Key Difference – In situ hybridization vs immunohistochemistry
Kreft- og infeksjonssykdomsdiagnostikk er en populær trend der nye proteomikk- og genomikkbaserte teknikker brukes for å identifisere svulster eller smittsomme celler, deres spredning og celleutviklingssteder og analysere det genetiske grunnlaget for de fleste smittsomme og smittsomme celler. Ikke-smittsomme sykdommer. Dette vil resultere i nøyaktig legemiddelbehandling og design og i utvikling av tilpassede terapier for sykdommer. In situ hybridisering (ISH) og Immunohistochemistry (IHC) er to så mye brukte teknikker innen kreftbiologi, og nøkkelforskjellen mellom in situ hybridisering og immunkjemi ligger i molekylene som brukes i analyseprosedyren. I ISH brukes nukleinsyreprobene i analyse, mens i IHC brukes monoklonale og polyklonale antistoffer for de diagnostiske bestemmelsene.
Hva er In Situ Hybridization (ISH)?
In situ hybridisering er en nukleinsyrehybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller seksjon av vev, i hele vevet eller i celler. Teknikken avhenger av teorien om Watson Crick-komplementær baseparing, noe som resulterer i enten DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider som kan oppdage muterte gener eller identifisere det nødvendige genet av interesse. Enkeltrådede DNA-sekvenser, dobbelttrådede DNA-sekvenser, enkelttrådede RNA-sekvenser eller syntetiske oligonukleotidsekvenser brukes som prober under hybridiseringsteknikk, og disse probene er merket med radioaktivt fosfor i 5'-enden for identifiseringsprosedyrer ved autoradiografi eller merket med fluorescerende fargestoffer. Det er forskjellige typer ISH-teknikker tilgjengelig basert på typen sonde som brukes og typen visualiseringsteknikk som følges.
Figur 01: Fluorescerende in situ-hybridisering
Det er mange anvendelser av ISH, hovedsakelig innen molekylær diagnostikk av infeksjonssykdommer for å identifisere tilstedeværelsen av patogener og bekrefte patogenet via molekylær diagnostikk. Den brukes også innen utviklingsbiologi, karyotyping og fylogenetisk analyse og fysisk kartlegging av kromosomer.
Hva er immunhistokjemi (IHC)?
I IHC-teknikken er hovedmolekylet som analyseres antigenet. Under IHC brukes monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener ved infeksjon eller malign celleproliferasjonsstatus. Teknikken er basert på antigen-antistoffbinding, og enzymmerker brukes til denne teknikken; en slik applikasjon er ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Markørene kan også være fluorescerende merkede antistoffer eller radiomerkede antistoffer.
Figur 02: Immunhistokjemi
IHC er mye brukt til påvisning av kreftceller. De diagnostiske prosedyrene retter seg mot antigenene som er tilstede på tumorcellene for å identifisere og karakterisere svulsten. Den samme prosedyren er innlemmet for å diagnostisere smittestoffer. Monoklonale og polyklonale antistoffer brukes også til å analysere ulike genprodukter ved å aktivere antistoff-antigen-bindingsreaksjonen mellom det ønskede proteinet og det syntetiske antistoffet som administreres.
Hva er likhetene mellom in situ-hybridisering og immunhistokjemi?
- ISH og IHC er svært spesifikke reaksjoner.
- Begge teknikkene er svært nøyaktige.
- Begge teknikkene kan brukes i diagnostikk for kreft og infeksjonssykdommer.
- Disse teknikkene utføres i sterile in vitro-miljøer.
- Begge er raske teknikker som gir reproduserbare resultater.
- ISH og IHC bruker deteksjonsmetoder som radiomerking og fluorescensteknikker.
Hva er forskjellen mellom in situ-hybridisering og immunhistokjemi?
In situ hybridisering vs immunhistokjemi |
|
| ISH er en nukleinsyrehybridiseringsteknikk som utføres direkte på en del eller del av vevet eller hele vevet. | IHC er en teknikk der monoklonale og polyklonale antistoffer brukes til å bestemme tilstedeværelsen av antigener, som er spesielle proteinmarkører plassert på celleoverflatene. |
| Type biomolekyler analysert | |
| ISH analyserer nukleinsyrer. | IHC analyserer proteiner-antigener. |
| Basis of Biochemical Reaction | |
| Komplementær baseparing mellom DNA-DNA eller DNA-RNA forekommer i denne teknikken. | Antigen-antistoffinteraksjoner er involvert i immunhistokjemi. |
| Enzyme-Linked Detection Methods | |
| Enzymtilknyttede deteksjonsmetoder kan ikke brukes i ISH. | Enzymkoblede deteksjonsmetoder kan brukes i IHC. |
Summary – In situ hybridization vs immunohistochemistry
Molekylær diagnostikk er raske og bekreftende metoder som kan brukes til å identifisere en ikke-smittsom sykdom som kreft eller smittsom sykdom som HIV eller tuberkulose basert på de molekylære markørene som er tilstede på cellene som fører til manifestasjonen av sykdommen. Molekylære markører kan være tilstede i form av uttrykte proteiner eller på genetisk nivå basert på hvilke forskjellige nye teknikker er introdusert for å øke effektiviteten og er mindre arbeidskrevende, selv om det er en høy kostnad forbundet med disse teknikkene. Således avhenger ISH av DNA-DNA eller DNA-RNA hybriddannelse, og IHC avhenger av de spesifikke reaksjonene mellom antistoff og antigen. Dette er forskjellen mellom in situ hybridisering.
Last ned PDF-versjon av In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til offline-formål i henhold til sitat. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom in situ hybridisering og immunhistokjemi.
