Nøkkelforskjell – monolag vs suspensjonskultur
Vevskultur er en metodikk som brukes til å indusere vekst av celler som er separert fra organismen og dyrkes i forskjellige kulturmedier. I vevskultur spiller kulturmediene en viktig rolle. Ulike celler vokser i forskjellige kulturmedier avhengig av cellenes fysiologiske og kjemiske egenskaper. Monolagskultur og suspensjonskultur er to hovedtyper av kulturer som brukes under prosessen med vevskultur. En monolagskultur er en forankringsavhengig kultur hvor cellen vokser mens den er festet til et substrat og suspensjonskultur er en forankringsuavhengig kultur hvor celleaggregater brukes til å etablere cellekulturer i flytende medier. Dette er hovedforskjellen mellom monolagskultur og suspensjonskultur.
Hva er monolagskultur?
Monolagskultur er definert som en type kultur der cellene dyrkes i et enkelt lag på en kolbe eller petriskål som inneholder kulturmediet. Enlagskultur blir også referert til som adherent kultur eller forankringsavhengig kultur. Årsaken til å referere til adherent eller forankringsavhengig kultur er at disse cellene trenger et substrat for festing under veksten. De blir festet til cellekulturen som inneholder substratet.
Substratene som brukes i kulturmediet bør lades før bruk. Disse ladede substratene fremmer celle-til-celle-interaksjoner. Elektrisk ioneutlader, toverdige kationbelegg og gammabestråling er kildene som brukes til å lade disse substratene. I monolagskulturmedium, når cellene er inokulert, reguleres veksten ved bruk av prosessen som kalles kontakthemming. Under kontaktinhibering stoppes celleveksten for å stoppe spredningen av normale celler når de dannet et monolag festet til overflaten.
Figur 01: Adherent Culture
Cellene som er avhengige av andre substrater for festing, refereres til som adherente celler. Disse adherente cellene er ofte avledet fra organvev som nyre osv. Disse cellene er immobile og er vanligvis festet til bindevevet. Derfor bør alle disse essensielle vekstfaktorene gis når disse cellene dyrkes på kulturmedier. Betydningen av monolagskultur er at den etterligner de opprinnelige naturlige forholdene for at cellen skal kunne etablere seg riktig.
Hva er suspensjonskultur?
En suspensjonskultur kan defineres som en type kultur hvor multiplikasjon av små aggregat av celler eller enkeltceller finner sted suspendert i et flytende medium som konstant omrøres. Med andre ord er suspensjonskultur også kjent som cellekultur av cellesuspensjonskultur. Denne kulturen hjelper til med etablering av enkeltcellekulturer som kan brukes i under undersøkelsen av planteceller med hensyn til deres forskjellige potensialer og egenskaper. Undersøkelser om dette aspektet kan brukes til å forstå sammenhengen mellom celler og deres påvirkning når det gjelder flercellede organismer.
Under den første planteutviklingen dannes det en kallus som er en masse udifferensierte celler. Dette vekstnivået forårsaker hindringer for identifisering av cellulære hendelser under vekst- og utviklingsfasene til planten. Suspensjonskultur ble introdusert for å overvinne denne situasjonen siden den ga et utmerket kulturmedium for etablering av enkeltcellekulturer fra småcelleaggregater oppnådd fra kallus. Dette ble brukt til å studere forskjellige morfologiske og biokjemiske aspekter under de innledende stadiene av en plantes utvikling.
Figur 02: Suspensjonskultur
I sammenheng med å oppnå en ideell cellekultur, er den typiske metoden å overføre en sprø masse kallus til et omrørt flytende medium hvor massen brytes og spres lett. Deretter siles de store kalliene ut mens småcelleaggregater og enkeltceller. Deretter overføres disse cellene til et annet medium. Aktivt voksende celler oppnås etter to til tre uker.
Hva er likhetene mellom monolag- og suspensjonskultur?
- Både monolag- og suspensjonskulturer er to typer cellekulturer som brukes for etablering av celle
- Både monolag- og suspensjonskulturer dyrkes på passende kulturmedier.
- Både monolag- og suspensjonskulturer brukes ofte i vevskultur.
Hva er forskjellen mellom monolag- og suspensjonskultur?
Monolayer vs Suspension Culture |
|
| En monolagskultur er en forankringsavhengig kultur der cellene dyrkes mens de er festet til et substrat. | Suspensjonskultur er en forankringsuavhengig kultur der multiplikasjon av små aggregater av celler eller enkeltceller finner sted suspendert i et flytende medium som omrøres. |
| Krav | |
| Monolagskultur krever et vevskulturbehandlet kar med periodisk passasje. | Suspensjonskultur kan oppnås med ikke-vevskulturbehandlede kar. |
| Vekstbegrensninger | |
| Veksten av monolagskultur vil begrenses av overflatearealet som direkte påvirker utbyttet. | Vekstbegrensning av suspensjonskulturen skjer ved konsentrasjonen av celler i mediet. |
| Celledisosiasjon | |
| Celledissosiasjon finner sted mekanisk eller enzymatisk i monolagskultur. | Suspensjonskultur krever ikke hjelp fra enzymer og mekaniske midler for celledissosiasjon. |
| Cellevisualisering | |
| Monolagskultur tillater enkel visualisering av celler. | Det er vanskeligere å se celler i suspensjonskulturer. |
| Function | |
| Monolagskultur brukes innen cytologi, forskning og kontinuerlig produkthøsting. | Suspensjonskultur brukes til bulkproduksjon av proteiner, forskningsstudier og batchhøsting. |
Sammendrag – monolag vs suspensjonskultur
Monolagskultur og suspensjonskultur er to hovedkulturer som brukes i vevskultur. Enlagskulturen er en forankringsavhengig kultur. Cellene dyrkes i denne kulturen hvor de er festet til et substrat som finnes i kulturen. Substratene lades før bruk med involvering av forskjellige kilder som toverdige belegg og ioneutlader. Suspensjonskulturer er forankringsuavhengige kulturer hvor cellene vokser uten hjelp av et substrat for feste. Denne kulturen hjelper til med etablering av enkeltcellekulturer som kan brukes i under undersøkelsen av planteceller med hensyn til deres forskjellige potensialer og egenskaper. Dette er forskjellen mellom monolagskultur og suspensjonskultur.
