Nøkkelforskjellen mellom ionebytte- og størrelseseksklusjonskromatografi er at ionebytterkromatografi brukes til å analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelseseksklusjonskromatografi brukes til å analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
Kromatografi er en analyseteknikk som kan brukes til å analysere ulike blandinger. De kromatografiske teknikkene er navngitt etter parameteren som brukes til å analysere stoffene – f.eks. størrelseseksklusjonskromatografi, ionebytterkromatografi osv.
Hva er Ion Exchange Chromatography?
Ionebytterkromatografi er en analyseteknikk der vi kan analysere ioniske stoffer. Det er ofte nyttig å analysere uorganiske anioner og kationer (dvs. klorid- og nitratanioner og kalium-, natriumkationer). Selv om det ikke er en veldig vanlig metode, kan vi analysere organiske ioner ved hjelp av den. Dessuten kan vi bruke denne teknikken for rensing av proteiner fordi proteiner er ladede molekyler ved visse pH-verdier. Her bruker vi en fast stasjonær fase som de ladede partiklene kan feste seg til. For eksempel kan vi bruke harpiksen polystyren-divinylbenzen-kopolymerer som fast bærer.
Figur 01: Teorien bak Ion Exchange Chromatography
For å forklare dette nærmere har den stasjonære fasen fikserte ioner som sulfatanioner eller kvaternære aminkationer. Hver av disse bør assosieres med et motion (et ion med motsatt ladning) hvis vi skal opprettholde nøytraliteten til dette systemet. Hvis motionet er et kation, kaller vi systemet som en kationbytterharpiks. Men hvis motionet er et anion, er systemet en anionbytterharpiks. Dessuten er det fem hovedtrinn i ionebytterkromatografi:
- Innledende fase
- Adsorpsjon av målet
- Start av eluering
- Slutt på eluering
- Regeneration
Hva er størrelsesekskluderingskromatografi?
Størrelseseksklusjonskromatografi eller SEC er en analytisk teknikk der molekyler i en blanding kan separeres etter størrelse og molekylvekt. Vanligvis fungerer det med store molekyler k alt makromolekyler. Vanligvis brukes en vandig løsning for analysen. Da kalles det gelfiltreringskromatografi. Når det er et organisk løsningsmiddel, kalles det gelpermeasjonskromatografi.
Gelfiltreringskromatografi er en form for størrelseseksklusjonskromatografi der vi bruker en vandig løsning som mobil fase. Derfor er den mobile fasen vi ofte bruker i denne teknikken en vandig buffer. Dessuten bruker vi en kromatografisk kolonne for denne separasjonen, og vi må pakke kolonnen med porøse perler. Vanligvis er Sephadex og agarose nyttige som porøst materiale. Derfor er dette materialet den stasjonære fasen av eksperimentet vårt. Dessuten kan vi bruke porestørrelsen til disse kulene for å bestemme størrelsen på makromolekyler som vi separerer. Det er imidlertid bare et estimat.
Figur 02: An Apparatus for Size Exclusion Chromatography
Gelpermeasjonskromatografi er en form for størrelseseksklusjonskromatografi der vi bruker et organisk løsningsmiddel som mobil fase. Derfor kan vi bruke løsninger som heksan og toluen til dette formålet. Den stasjonære fasen er et porøst materiale, det samme som ved gelfiltreringskromatografi. Denne teknikken brukes ofte på polymerer og annet organisk løselig materiale. Teknikkens virkemåte ligner på gelfiltreringskromatografi.
Hva er forskjellen mellom Ion Exchange og Size Exclusion Chromatography?
Kromatografi er en analyseteknikk som kan brukes til å analysere ulike blandinger. Hovedforskjellen mellom ionebytte- og størrelseseksklusjonskromatografi er at ionebytterkromatografi brukes til å analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelseseksklusjonskromatografi brukes til å analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
Infografikken nedenfor gir mer informasjon om forskjellen mellom ionebytte- og størrelsesekskluderingskromatografi.
Sammendrag – Ion Exchange vs Size Exclusion Chromatography
Kromatografi er en analyseteknikk som kan brukes til å analysere ulike blandinger. Hovedforskjellen mellom ionebytte- og størrelseseksklusjonskromatografi er at ionebytterkromatografi brukes til å analysere ioniske stoffer i henhold til ladningen, mens størrelseseksklusjonskromatografi brukes til å analysere store molekyler i henhold til størrelsen.
