Nøkkelforskjellen mellom ionepar- og ionebytterkromatografi er at i ioneparkromatografi kan ioner i prøven "pares" og separeres som ioneparet, mens i ionebytterkromatografi kan ioner i prøven separeres som kationer og anioner separat.
Kromatografi er en viktig teknikk som fører til separasjon av ulike komponenter i en blanding. Ionepar- og ionebytterkromatografi er analytiske teknikker vi kan bruke for å skille ioner og polare molekyler i en blanding, basert på den elektriske ladningen de bærer med seg.
Hva er ioneparkromatografi?
Ioneparkromatografi er en analytisk teknikk der ioner i prøven pares og separeres som ionepar. Ioneparing refererer til nøytraliseringen; når kationer pares med anioner, nøytraliseres deres elektriske ladninger. Her gjøres denne separasjonsteknikken i en omvendt fasekolonne. I denne prosessen må vi bruke ioneparingsmidler for å danne ionepar og skille ionene i prøven. Vanligvis er ioneparingsmidlene forbindelser som inneholder hydrokarbonkjeder. Disse ioneparingsmidlene bør ha motsatt elektrisk ladning til ionene i prøven; ellers vil ikke ioner pares (ioner med samme ladning parer seg ikke, fordi de frastøter hverandre). I tillegg kan disse ioneparingsmidlene øke hydrofobiteten og retensjonen også.
Dessuten lar bruk av ioneparmidler som den mobile fasen oss enkelt skille ioniske og høypolare stoffer. For eksempel, hvis vi legger til et reagens som har en hydrofob funksjonell gruppe, kan den stasjonære fasen beholde denne hydrofobe funksjonelle gruppen; dermed blir parede ioner også beholdt på den stasjonære fasen sammen med den tilsatte hydrofobe funksjonelle gruppen. 1-pentylnatriumsulfonat og 1-heksylnatriumsulfonat er viktige som de anioniske motionene for kationene som er tilstede i prøven, og 1-pentansulfonat er viktig som et kationisk motion for anioner.
Fordeler med ioneparkromatografi
Det er flere fordeler med ioneparkromatografi sammenlignet med ionebyttekromatografi;
- Enkelt å forberede nødvendige bufferløsninger
- Kan velge et bredt utvalg av karbonkjedelengder i ioneparingsmidler
- Resultatene er svært reproduserbare
- Kan få en forbedret toppform
- Redusert separasjonstid
Hva er Ion Exchange Chromatography?
Ionebytterkromatografi er en form for væskekromatografi der vi kan analysere ioniske stoffer. Vi bruker det ofte til å analysere uorganiske anioner og kationer (dvs. klorid- og nitratanioner og kalium, natriumkationer). Selv om det er mindre vanlig, kan vi analysere organiske ioner også. Dessuten kan vi bruke denne teknikken for rensing av proteiner fordi proteiner er ladede molekyler ved visse pH-verdier. Her bruker vi en fast stasjonær fase som de ladede partiklene kan feste seg til. For eksempel kan vi bruke harpiksen polystyren-divinylbenzen-kopolymerer som fast bærer.
For å forklare dette nærmere har den stasjonære fasen fikserte ioner som sulfatanioner eller kvaternære aminkationer. Hver av disse bør assosieres med et motion (et ion med motsatt ladning) hvis vi skal opprettholde nøytraliteten til dette systemet. Hvis motionet er et kation, kaller vi systemet som en kationbytterharpiks. Men hvis motionet er et anion, er systemet en anionbytterharpiks. Dessuten er det fem hovedtrinn i ionebytterkromatografi:
- Innledende fase
- Adsorpsjon av målet
- Start av eluering
- Slutt på eluering
- Regeneration
Hva er forskjellen mellom ionepar- og ionebyttekromatografi?
Ionepar- og ionebytterkromatografier er analytiske teknikker vi kan bruke for å skille ioner og polare molekyler i en blanding. Den viktigste forskjellen mellom ionepar og ionebytterkromatografi er at i ioneparkromatografi kan vi gjøre ioner i prøven "parret" og skille den som ioneparet, mens i ionebytterkromatografi kan vi separere ionene i prøven som kationer og anioner separat.
Infografikken nedenfor viser flere sammenligninger relatert til forskjellen mellom ionepar- og ionebytterkromatografi.
Sammendrag – Ion Pair vs Ion Exchange Chromatography
Ionepar- og ionebytterkromatografi er analytiske teknikker vi kan bruke for å skille ionene og polare molekylene i en blanding. Den viktigste forskjellen mellom ionepar og ionebytterkromatografi er at i ioneparkromatografi kan ioner i prøven "pares" og separeres som ioneparet, mens i ionebytterkromatografi kan ioner i prøven separeres som kationer og anioner separat.
