Nøkkelforskjell – HPLC vs LCMS
La oss først se på betydningen av HPLC og LCMS før vi analyserer forskjellen mellom HPLC og LCMS. Kromatografi er en separasjonsteknikk i kjemisk analyse hvor prøvebestanddeler separeres under passasje gjennom et kromatografisk medium. Det involverer også interaksjon med prøven, den stasjonære fasen og den mobile fasen. HPLC står for High Performance Liquid Chromatography, og den brukes som en væskekromatografimetode i analytisk kjemi. Kombinasjonen av væskekromatografi og massespektroskopi (LCMS) er utviklet for kvantitativ analyse av utvalgte biomolekyler, og det er en svært sensitiv, nøyaktig og spesifikk analyseprosedyre sammenlignet med HPLC. Dette er nøkkelforskjellen mellom HPLC og LCMC. Denne artikkelen vil introdusere deg til HPLC og LCMC som omhandler kjemisk analyse og diskuterer forskjellene mellom HPLC og LCMS.
Hva er HPLC?
Høyytelses væskekromatografi (HPLC) er en populær separasjonsteknikk innen analytisk kjemi. Den brukes hovedsakelig til å skille komponentene, identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding. Tidligere ble denne metoden kjent som høytrykksvæskekromatografi fordi den var avhengig av pumper for å strømme et trykksatt flytende løsningsmiddel bestående av prøveblandingen gjennom en kolonne pakket med et fast adsorberende materiale. Hver eneste bestanddel i prøveblandingen samhandler forskjellig med det faste adsorberende materialet, noe som resulterer i forskjellige strømningshastigheter for forskjellige bestanddeler. Dette kan føre til at komponentene separeres når de strømmer ut HPLC-kolonnen.
HPLC har blitt brukt til ulike applikasjoner som analyse av vitamin D-nivåer i blod, ulovlig narkotikabruk av idrettsutøvere ved å oppdage narkotikarester i urinen deres, sortere ut bestanddelene i en kompleks biologisk prøve for forskningsformål og analyse og produksjon av legemidler.
Hva er LCMS?
Væskekromatografi–massespektrometri (LCMS) er en analytisk teknikk som kombinerer de fysiske separasjonsevnene til væskekromatografi med masseanalyseevnene til massespektrometri (MS). Væskekromatografi er en separasjonsteknikk, og massespektrometri brukes til å analysere masse-til-ladning-forholdet mellom ladede partikler. Den fysiske separasjonen oppnås vanligvis ved HPLC og alternativt LCMS også kjent som HPLC-MS. LCMS er en dominerende analytisk teknikk som har en svært høy nøyaktighet, sensitivitet og spesifisitet sammenlignet med HPLC. Dermed er det nyttig i mange applikasjoner som forskningsformål, medikamentanalyse, matanalyse osv. LCMS brukes hovedsakelig til å separere, oppdage, identifisere og kvantifisere biokjemiske egenskaper til en bestemt prøve i nærvær av komplekse kjemiske blandinger.
Hva er forskjellen mellom HPLC og LCMC?
Akronym og definisjon av HPLC og LCMC
HPLC: HPLC står for High-Performance Liquid Chromatography. Det er en separasjonsteknikk som hovedsakelig brukes til å skille komponentene, identifisere og kvantifisere hver komponent i en blanding.
LCMS: LCMS står for Liquid Chromatography and Mass Spectrometry. Det er en analytisk teknikk som kombinerer de fysiske separasjonsevnene til væskekromatografi med masseanalyseevnene til massespektrometri (MS).
Kjennetegn ved HPLC og LCMC
klassifisering
HPLC: Dette er kun en væskekromatografimetode.
LCMS: Dette er en kombinasjon av væskekromatografimetoden og massespektrometrimetoden.
Effektivitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre effektiv og tregere.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen effektiv og raskere.
Sensitivitet
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre følsom.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mer sensitiv.
Spesificity
HPLC: Sammenlignet med LCMS er HPLC-analysen mindre spesifikk.
LCMS: Sammenlignet med HPLC er LCMS-analysen mer spesifikk.
Nøyaktighet
HPLC: HPLC gir mindre nøyaktige resultater enn LCMS for bestemmelse av enkelte kjemikalier.
LCMS: LCMS gir mer nøyaktige resultater enn HPLC for bestemmelse av enkelte kjemikalier.
Component
HPLC: HPLC kan betraktes som en komponent av LCMS.
LCMS: LCMS kan ikke betraktes som en komponent av HPLC.
ionekilde
HPLC: Ionekilde finnes ikke i HPLC-instrument.
LCMS: Ionekilde er til stede i LCMS-instrumentet.
Applications
HPLC: Ioner, polymerer, organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres ved hjelp av HPLC.
LCMS: Organiske molekyler og biomolekyler kan analyseres. I motsetning til HPLC kan LCMS brukes til å undersøke ufullstendig oppløste blandinger.
Operation
HPLC: Diagrammet for et HPLC-instrument er gitt i figur 1, og det inkluderer vanligvis en autosampler, pumper og en detektor. Prøvetakeren introduserer prøveblandingen i den mobile fasen (trykksatt blanding av løsemidler som vann, acetonitril og/eller metanol) som overfører den til kolonnen. Pumpene leverer ønsket strømning og sammensetning av den mobile fasen gjennom kolonnen. Kolonnen er fylt med adsorbenten, som er en kornete fast partikkel som silika eller polymerer. Detektoren produserer et signal proporsjon alt med mengden av prøvebestanddeler i kolonnen, og tillater derfor kvantifiserbar analyse av de valgte prøvebestanddeler. HPLC-instrumentet styres, og dataanalyse leveres av en digital mikroprosessor og brukerprogramvare.
Figur 1: Diagram av HPLC-instrument
LCMS: Diagrammet av LCMS-instrumentet er gitt i figur 2. Prøveekstraktet settes inn i kolonnen som består av HPLC. Denne kolonnen beholder prøvemetabolitter basert på fysiske karakterer, og forskjellige metabolitter strømmer til massespektrometeret med forskjellige tidsintervaller. Massespektroskopi brukes for å vurdere masser av partikler, for å bestemme elementarrangementet til et molekyl og for å klargjøre molekylstrukturene. Imidlertid bør prøven ioniseres for å generere ladede molekyler for å bestemme deres masse-til-ladning-forhold. Derfor, i stedet for HPLC-instrumenter, består LCMS ytterligere tre moduler som jernkilde, en masseanalysator og en detektor. En ionekilde kan transformere gassfaseprøve til ioner og en masseanalysator som grupperer ionene etter massene ved hjelp av elektromagnetiske felt. Til slutt kvantifiserer en detektor verdiene og leverer data for hvert ion som er tilstede i prøven. LCMS-teknikken kan brukes til både kvalitative og kvantitative applikasjoner.
Figur 2: Diagram av LCMS-instrument
Avslutningsvis er HPLC en væskekromatografimetode, mens LCMS er en kombinasjon av væskekromatografi og massespektrometri. Begge disse analyseteknikkene har forskjellige egenskaper, men de kan brukes til å identifisere og kvantifisere matsammensetninger, legemidler og andre bioaktive molekyler.
