Nøkkelforskjellen mellom differensial- og tetthetsgradientsentrifugering er at differensialsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på størrelsen på partiklene, mens tetthetsgradientsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på partiklenes tetthet.
Sentrifugering er en separasjonsmetode av ulike komponenter i en analyttblanding. Denne metoden involverer rotasjon av prøven rundt en fast akse, noe som forårsaker produksjon av en sentrifugalkraft. Sentrifugalkraften får partiklene i prøven til å bevege seg ned gjennom et flytende medium. Denne prosessen forårsaker sedimentering av partikler eller celler med forskjellige størrelser og tettheter med forskjellige hastigheter.
Hva er differensiell sentrifugering?
Differensiell sentrifugering er en analytisk teknikk der vi kan separere partiklene i en blanding avhengig av størrelsen på partikkelen. Det er den enkleste formen for sentrifugering og også k alt differensialpelletering. Denne metoden er viktig for å skille komponentene i en celle. Partikler med forskjellige størrelser gjennomgår sedimentering med forskjellige hastigheter ved sentrifugeringen. Med andre ord sedimenterer store partikler raskere enn mindre partikler. Dessuten kan sedimentasjonshastigheten økes ved å øke sentrifugalkraften.
Når man vurderer dets anvendelser, er differensiell sentrifugering nyttig for å høste celler eller produsere rå subcellulære fraksjoner fra et vevshomogenat.f.eks. et leverhomogenat inneholder kjerner, mitokondrier, lysosomer og membranvesikler. Hvis vi sentrifugerer dette homogenatet med lav hastighet og i kort tid, kan vi få de store kjernene som pellet. Hvis vi bruker høy sentrifugalkraft, så kan vi få mitokondrier i pelleten. Biologiske prøver er imidlertid alltid utsatt for kontaminering.
Hva er tetthetsgradientsentrifugering?
Tetthetsgradientsentrifugering er en analytisk teknikk der vi kan separere partiklene i analyttblandingen basert på partikkelens tetthet. I denne metoden konsentreres stoffene i en løsning av cesiums alter eller i sukrose. Metoden innebærer fraksjonering av partikler basert på oppdriftstetthet. Tetthetsgradienten i denne metoden er cesiums altet eller sukrosemediet. Det finnes to typer tetthetsgradientsentrifugering: rate-zonla sentrifugering og isopyknisk sentrifugering.
Rate-sonal sentrifugering involverer separasjonsmediet som har en lagdelt struktur med en smal sone på toppen av tetthetsgradienten. I denne prosessen har partiklene en tendens til å bevege seg med forskjellige hastigheter under sentrifugalkraften avhengig av partiklenes tetthet. Vanligvis produserer alle partiklene pellets fordi tettheten til partiklene er høyere enn tetthetsgradienten.
Isopycnic sentrifugering er den andre typen tetthetsgradient-sentrifugering. Det starter med en homogen løsning. Under sentrifugalkraften beveger partiklene i analyttblandingen seg inntil tettheten til partiklene er lik tetthetsgradienten. Derfor kan vi også kalle denne teknikken likevektsentrifugering.
Hva er forskjellen mellom differensial- og tetthetsgradientsentrifugering?
Differensial- og tetthetsgradientsentrifugering er to typer sentrifugeringsprosesser involvert i separasjonen av komponenter i en analyttblanding. Den viktigste forskjellen mellom differensial- og tetthetsgradientsentrifugering er at differensialsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på størrelsen på partiklene, mens tetthetsgradientsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på partiklenes tetthet.
Infografikk nedenfor viser flere forskjeller mellom differensial- og tetthetsgradientsentrifugering.
Sammendrag – Differensial vs Density Gradient Sentrifugering
Differensial- og tetthetsgradientsentrifugering er to typer sentrifugeringsprosesser involvert i separasjonen av komponenter i en analyttblanding. Den viktigste forskjellen mellom differensial- og tetthetsgradientsentrifugering er at differensialsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på størrelsen på partiklene, mens tetthetsgradientsentrifugering separerer partikler i en blanding basert på partiklenes tetthet.
