Nøkkelforskjellen mellom RIA og ELISA er at radioimmunoassay (RIA) er en immunoassay-teknikk som bruker radioisotoper for å påvise antigen-antistoff-komplekser, mens enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) er en immunoassay-teknikk som bruker enzymer for å påvise antigen. -antistoffkomplekser.
Deteksjon av spesifikke proteiner som antigener er ekstremt viktig i sykdomsdiagnostikk. Derfor er RIA og ELISA to immunanalyseteknikker som brukes i laboratorier for å oppdage spesifikke proteiner raskt, spesielt antigener. Generelt binder et spesifikt antistoff seg til målantigenet og danner et synlig kompleks kjent som precipitin. Disse antistoff- og antigenkompleksene kan identifiseres ved hjelp av forskjellige teknikker. Teknikken for å påvise antigen-antistoffkomplekset ved å bruke radioisotoper er kjent som RIA, og teknikken for å påvise antigen-antistoffkomplekset ved å bruke enzymer er kjent som ELISA.
Hva er RIA?
Radioimmunoassay (RIA) er en immunoanalyseteknikk som oppdager antigen- og antistoffkomplekser ved hjelp av radioisotoper. Rosalyn Sussman Yalow utviklet denne teknikken i 1960 med hjelp av Solomon Berson. For denne bemerkelsesverdige oppdagelsen vant Rosalyn Sussman Yalow Nobelprisen i medisin i 1977. Vanligvis, i radioimmunoassay, blir en kjent mengde av et antigen først gjort radioaktivt. Denne teknikken bruker ofte gamma-radioaktive isotoper av jod, k alt 125-I, for å merke antigener. Disse radioisotopene fester seg norm alt til tyrosinaminosyren til antigenet. Deretter blandes det radiomerkede antigenet med antistoff. Som et resultat binder det radiomerkede antigenet og antistoffet spesifikt til hverandre.
Senere tilsettes en prøve av serum som inneholder en ukjent mengde av det samme antigenet. Dette får det umerkede antigenet fra serumet til å konkurrere med det radiomerkede antigenet om antistoffbindingsseter. Etter hvert som konsentrasjonen av umerket antigen øker, binder mer av det seg til antistoffet, og fortrenger den radiomerkede varianten. Dermed reduserer det forholdet mellom antistoffbundet radiomerket antigen og fritt radiomerket antigen. På slutten av prosedyren separeres de bundne antigenene ut. Til syvende og sist måles radioaktiviteten til frie antigener i den gjenværende supernatanten ved hjelp av en gammateller.
Hva er ELISA?
ELISA er en immunanalyseteknikk som oppdager antigen- og antistoffkomplekser ved å bruke enzymer. Det er en biokjemisk analytisk analyse først beskrevet av Engvall og Perlmann i 1971. I de fleste enkle former for ELISA-teknikker er antigener fra pasientprøven festet til en fast overflate. Deretter påføres et matchende antistoff over overflaten, slik at det kan binde seg til antigenet.
Figur 01: ELISA
Dette antistoffet er knyttet til et enzym. Senere fjernes eventuelle ubundne antistoffer ved å vaske med vaskemiddel. I det siste trinnet av denne teknikken tilsettes enzymets substrat. Hvis det er en riktig binding av antigen og antistoff, produserer den påfølgende reaksjonen et detekterbart fargesignal, oftest en fargeendring.
Hva er likhetene mellom RIA og ELISA?
- RIA og ELISA er immunoanalyseteknikker.
- Begge teknikkene har antigen- og antistoffkompleksdannelse.
- Disse teknikkene kan brukes til å oppdage ukjente proteiner i prøver.
- De brukes begge til diagnostisering av sykdommer i laboratorier.
- Begge er svært spesifikke og sensitive teknikker.
Hva er forskjellen mellom RIA og ELISA?
RIA er en immunoanalyseteknikk for påvisning av antigen-antistoffkomplekset ved bruk av radioisotoper. ELISA er en immunoanalyseteknikk for påvisning av antigen-antistoffkomplekset ved bruk av enzymer. Så dette er nøkkelforskjellen mellom RIA og ELISA. Dessuten, i RIA-teknikken er antigenet merket, men i ELISA er antistoffet merket. Videre, i RIA-teknikken, er merkingsmolekyler radioisotoper, mens i ELISA er merkingsmolekyler enzymer. Dermed er dette enda en forskjell mellom RIA og ELISA.
Infografien nedenfor viser flere forskjeller mellom RIA og ELISA i tabellform.
Sammendrag – RIA vs ELISA
Immunoassays spiller en svært viktig rolle i ulike bioanalytiske omgivelser, for eksempel klinisk diagnostikk, biofarmasøytisk analyse, miljøovervåking, biosikkerhet og mattesting. Siden 1960-tallet har et bredt spekter av immunanalyser blitt utviklet. RIA og ELISA er begge immunanalyseteknikker. RIA er en immunanalyseteknikk for å påvise antigen-antistoffkompleks ved å bruke radioisotoper. ELISA er en immunanalyseteknikk for å påvise antigen-antistoffkompleks ved å bruke enzymer. Dermed er dette sammendraget av forskjellen mellom RIA og ELISA.
