Nøkkelforskjell – primærcellekultur vs cellelinje
Fagfeltet har tatt en stor vri med introduksjonen av celledyrking og bruk av cellelinjer til forskning. Ulike tester gjøres på kunstig preparerte celler og cellelinjer for å vurdere oppførselen til cellen. Mest menneskebasert forskning krever celledyrking og cellelinjer for å validere resultatene, spesielt når forskningsstudiene er basert på farmakologi og medikamentoppdagelse. Primær cellekultur er en kultur fremstilt ved direkte isolering av celler via mekaniske eller enzymatiske metoder. En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig å passere en primær cellekultur for å oppnå en cellelinje som har ervervet homologe karakterer. Den viktigste forskjellen mellom den primære cellekulturen og cellelinjen er antall passeringstider hver av dem har. Den primære cellekulturen er direkte isolert, mens en cellelinje fremstilles ved å passere en primær cellekultur i flere ganger.
Hva er en primærcellekultur?
Primærcellekultur er et cellekulturpreparat ved å isolere celler direkte fra kilden via mekaniske eller enzymatiske metoder. Cellene isoleres ved trypsinisering eller ikke-trypsiniseringsmetoder. De primære cellekulturene dyrkes i egnede vekstmedier som inneholder vekstfaktorer, hormoner, lipider og andre udefinerte komponenter. Enkelte medier må ledsages av serum. Mediene sørger for at vekstbetingelsene er optimalisert, og cellene overlever under optimale forhold. Celler kan isoleres fra forskjellige vevskilder som levervev, endotel og nervevev hos mennesker eller høyerestående dyr via trypsinisering.
Ved isolering av celler fra planter og mikroorganismer brukes spesielle ekstraksjonsprosedyrer som bruker både mekaniske og kjemiske metoder. Disse isolerte cellene kan immobiliseres på en solid bærer eller kan passeres i flere generasjoner for å utvikles til en cellelinje.
Primære cellekulturer er hovedsakelig av to typer; Adherente cellekulturer og suspensjonscellekulturer. Adherente primære cellekulturer er forankringsavhengige, og de krever solid støtte for veksten. De adherente primære cellekulturene er hovedsakelig avledet fra vev eller organer. Suspensjonens primære cellekulturer er forankringsuavhengige, og de vokser i flytende medier. Suspensjonskulturene bør omrøres kontinuerlig under vekstfasen. Suspensjonens primære cellekulturer kan avledes direkte fra blod.
Primære cellekulturer har relativt kortere levetid, men informasjonen hentet fra primære cellekulturer under in vitro-forhold gir grunnlaget for mange studier. De er nyttige for å studere cellens egenskaper, både morfologisk og kjemisk atferd.
Hva er en mobillinje?
Cellelinjer er mye brukt i forskning og i dag er cellelinjer som kreftcellelinjer, levercellelinjer og nyrecellelinjer kommersielt tilgjengelige for forskningsformål. Cellelinjene fremstilles ved kontinuerlig passasje av primær cellekultur. Passering refererer til subkultureringsprosessen hvor cellekulturene utvikles til en cellelinje. Disse cellelinjene er kulturer i to-dimensjonale eller tredimensjonale matriser og vedlikeholdt som cellelinjer.
Cellelinjer er klassifisert som endelige og kontinuerlige cellelinjer. Finitte cellelinjer utsettes for et bestemt antall passasjer (20 – 30 passasjer). Etter fullføring av det nødvendige antall passasjer går cellelinjen inn i et aldersstadium. Disse cellene er enkle å håndtere siden deres vekst er bestemt. De kontinuerlige cellelinjene blir også referert til som udødeliggjorte cellelinjer. Disse cellelinjene har ikke et bestemt antall passasjer. De vokser i det uendelige og er dermed i stand til å tilegne seg mutasjoner. Derfor er kontinuerlige cellelinjer lett å mutere og dermed endres de i sine morfologiske og genetiske egenskaper, i motsetning til i endelige cellelinjer.
Figur 01: Cellelinje
Cellelinjer brukes ettersom det er mer praktisk enn å bruke en primær cellekultur, da den kan brukes om og om igjen i en viss periode. Men den er mer utsatt for mutasjoner og forurensninger ettersom spredningen deres øker.
Hva er likhetene mellom primærcellekultur og cellelinje?
- Både cellekultur- og cellelinjetyper brukes i forskning for å studere morfologiske, kjemiske og genetiske egenskaper til en celle.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper ekstraheres ved hjelp av mekaniske og enzymatiske metoder.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper krever vekstmedier og spesifikke vekstbetingelser.
- Både cellekultur- og cellelinjetyper er utsatt for mutasjoner.
Hva er forskjellen mellom primær cellekultur og cellelinje?
Primær cellekultur vs cellelinje |
|
| En primær cellekultur er en kultur fremstilt ved direkte isolering av celler ved hjelp av mekaniske eller enzymatiske metoder. | En cellelinje fremstilles ved kontinuerlig å passere en primær cellekultur for å oppnå en cellelinje som har ervervet homologe karakterer. |
| Antall passasjer | |
| Primærcellekulturer passeres ikke, cellene opprettholdes under kulturbetingelser. | Celler passeres definitivt eller på ubestemt tid ved fremstilling av cellelinjer. |
| Typer | |
| Adherent primær cellekultur og Suspensjon primær cellekultur er to typer primære cellekulturer. | Finitt cellelinje og kontinuerlig cellelinje er to typer cellelinjer. |
| Levetid | |
| Primærcellekulturer har kort levetid. | Mobilelinjer har lengre levetid. |
Sammendrag – Primær cellekultur vs cellelinje
Primære cellekulturer og cellelinjer er mye brukt i forskning for å studere atferdsmønstrene til forskjellige celler under forskjellige forhold og under forskjellige farmakologiske aspekter. Primære cellekulturer er direkte isolert fra kildeorganet eller vevet og dyrkes på et kulturmedium. Forholdene er optimalisert for veksten av de spesifikke cellene. Cellelinjer, derimot, er fremstilt ved å passere de primære cellekulturene et begrenset eller uendelig antall ganger. Cellelinjer er kommersielt tilgjengelige og er populære blant forskere på grunn av den enkle bruken.
