Nøkkelforskjellen mellom HEK293 og HEK293t er at HEK293 er en udødeliggjort cellelinje avledet fra den embryonale humane nyren som er transfektert med skåret humant adenovirus type 5DNA, mens HEK293t er en dattercellelinje avledet fra HEK293 opprinnelige cellelinje som er transfektert med en plasmidvektor som bærer SV40-replikasjonsorigo.
Transfeksjon er vanligvis definert som prosessen med å introdusere fremmed DNA og RNA i celler for å påvirke deres genotype og fenotype. Slike introduksjoner av fremmede nukleinsyrer gjennom ulike biologiske, kjemiske og fysiske metoder kan endre egenskapene til cellen. Til syvende og sist tillater dette studiet av genfunksjon og proteinuttrykk i sammenheng med cellen. HEK293 og HEK293t er to cellelinjer som har vært mye brukt i cellebiologisk forskning i mange år på grunn av deres tilbøyelighet til transfeksjon.
Hva er HEK293?
HEK293 er en udødeliggjort cellelinje avledet fra den embryonale humane nyren som er transfektert med klippet humant adenovirus type 5DNA for å produsere mange rekombinante proteiner. HEK293s ble opprinnelig isolert fra humane nyreceller av den nederlandske biologen Alex Van der Eb i 1973. Disse cellene ble dyrket i vevskultur fra et kvinnelig foster. Senere ble de transfektert med klippet humant adenovirus type 5DNA av Frank Graham, en postdoktor ved Van der Ebs laboratorium. Denne cellelinjen ble k alt HEK293 fordi den var Franks 293rd eksperiment.
Figur 01: HEK293
Inkorporering av adenovirale gener i HEK-cellegenomet gjør at disse cellene kan produsere en høy mengde rekombinante proteiner veldig effektivt. Dessuten inneholder den adenovirale vektoren CMV-promoterregionen; dermed øker det denne effektiviteten ytterligere. Denne cellelinjen har blitt brukt som vert for genekspresjonsstudier. Denne cellelinjen brukes også av bioteknologiindustrien til å produsere terapeutiske proteiner for genterapi.
Hva er HEK293t?
HEK293t er en dattercellelinje avledet fra den originale HEK293-cellelinjen som er transfektert med en plasmidvektor som bærer SV40-replikasjonsorigo for å produsere en høy mengde rekombinante proteiner. HEK293t er en human cellelinje som uttrykker en mutant versjon av SV40 store T-antigenet. HEK293t ble opprettet i Michele Carlos laboratorium i Stanford gjennom stabil transfeksjon av HEK29E-cellelinjen med et plasmid som koder for en temperaturfølsom mutant av SV40 store T-antigenet. Det ble opprinnelig referert til som 293/tsA1609neo. Dette er fordi transfeksjonen ble brukt til å lage en cellelinje som gir neomycinresistens og ekspresjon av tsA 1609-allelen til SV40 large T-antigen.
Figur 02: HEK293t
På grunn av ekspresjonen av en mutant versjon av SV40 stort T-antigen, kan de transfekterte plasmidene med SV 40-replikasjonsorigo øke mengden av rekombinant protein i stor grad. Denne cellelinjen brukes ofte i den bioteknologiske industrien for proteinekspresjon og produksjon av rekombinante retrovirus.
Hva er likhetene mellom HEK293 og HEK293t?
- HEK293 og HEK293t er to cellelinjer som har blitt mye brukt i cellebiologiforskning på grunn av deres tilbøyelighet til transfeksjon.
- Begge cellelinjene er laboratorieavledet.
- Disse cellelinjene kan i stor grad øke mengden rekombinant proteinproduksjon.
- De er laget ved å transfisere embryonale humane nyreceller med en plasmidvektor.
Hva er forskjellen mellom HEK293 og HEK293t?
HEK293 er en udødeliggjort cellelinje avledet fra den embryonale humane nyren som er transfektert med klippet humant adenovirus type 5DNA. I motsetning til dette er HEK293t en dattercellelinje avledet fra den originale HEK293-cellelinjen som er transfektert med en plasmidvektor som bærer SV40-replikasjonsopprinnelsen. Så dette er nøkkelforskjellen mellom HEK293 og HEK293t. Videre uttrykker ikke HEK293 den mutante versjonen av SV40 store T-antigenet. På den annen side uttrykker HEK293t mutantversjonen av SV40 large T-antigenet.
Følgende infografikk viser forskjellene mellom HEK293 og HEK293t i tabellform for side ved side-sammenligning.
Sammendrag – HEK293 vs HEK293t
HEK293 og HEK293t er to cellelinjer som har blitt mye brukt i cellebiologiforskning på grunn av deres jevne vekst og tilbøyelighet til transfeksjon. HEK293 er en udødeliggjort cellelinje avledet fra en embryonal human nyre som er transfektert med skåret humant adenovirus type 5DNA, mens HEK293t er en dattercellelinje avledet fra HEK293 original cellelinje som er transfektert med en plasmidvektor som bærer SV40 replikasjonsopprinnelse. Dermed oppsummerer dette forskjellen mellom HEK293 og HEK293t.
