Transformasjon vs Transfeksjon
Transformasjon og transfeksjon er to enkle teknikker som brukes for å introdusere et fremmed gen i en vertscelle. Disse teknikkene avhenger imidlertid av typen verts- eller vektorsystemer.
Hva er celletransformasjon?
Transformasjon er teknikken som brukes for å introdusere gener i gjær- og bakterieceller. Denne teknikken forårsaker vanligvis arvelige endringer i gener, og dermed er uttrykket av genet permanent. Bakterietransformasjonen ble først introdusert i 1928 av Frederick Griffith. Så tidlig på 1970-tallet ble denne teknikken brukt i E.coli. Under prosessen med transformasjon av E. coli, blir cellene dynket i iskald løsning av CaCl2 Dette trinnet gjør E.coli-celler kompetente. Deretter blandes de kompetente cellene med plasmid-DNA og inkuberes på is i 20-30 minutter. Deretter gis et kort varmesjokk for å muliggjøre overføring av DNA inn i cellen. Til slutt plasseres cellene i en næringsbuljong og inkuberes ved 37 °C i 60-90 minutter for å etablere plasmidene. Når disse trinnene er fullført, kan de transformerte cellene plasseres på et passende medium for forplantning av celler. Siden transformasjon anses som en ineffektiv teknikk, kan den ikke brukes til å forberede klonbanker.
Hva er celletransfeksjon?
Transfeksjon er en metode for introduksjon av et fremmed gen, vanligvis, i pattedyrceller. Det er to metoder for transfeksjon; nemlig forbigående transfeksjon og stabil transfeksjon. Ved forbigående transfeksjon er genuttrykk tilgjengelig i en begrenset tid; dermed forårsaker endringen av genet midlertidig uttrykk. Denne transfeksjonsmetoden er enkel og rask; derfor kan den brukes rutinemessig. En ulempe med forbigående transfeksjon er vanskeligheten med å søke om proteinsyntesesystemer i stor skala.
Under stabil transfeksjon integreres et målgen i vertscellens genom, og dermed er genuttrykket permanent, i motsetning til den forbigående transfeksjonen.
Hva er forskjellen mellom transformasjon og transfeksjon?
• Transformasjon er introduksjon av et gen i en prokaryot celle (bakterie og gjær), mens transfeksjon vanligvis kalles introduksjon av et gen i en pattedyrcelle.
• Transformasjon resulterer i arvelig endring i gener, mens transfeksjon kan resultere i enten midlertidig ekspresjon eller permanente endringer i gener.
