Nøkkelforskjellen mellom genamplifisering og genkloning er at genamplifikasjonen er prosessen med å lage mange kopier av genet av interesse in vitro ved en polymerasekjedereaksjon. Men genkloning er en prosess for å lage mange kopier av genet av interesse in vivo ved å lage et rekombinant plasmid og transformere det til en vertsbakterie.
Et gen er et spesifikt fragment av DNA som koder for et protein. En organisme har tusenvis av gener. Dessuten er det mulig å multiplisere DNA-sekvensene til viktige gener ved å bruke molekylærbiologiske teknikker. Genamplifisering og genkloning er to slike prosedyrer. Begge prosedyrene produserer mange kopier av et gen av interesse. Det er imidlertid en forskjell mellom genamplifisering og genkloning når det gjelder deres metodikk.
Hva er genforsterkning?
Genamplifikasjon er prosessen med å lage kopier av et bestemt gen ved hjelp av polymerasekjedereaksjon. For å amplifisere et gen, bør DNA fra den spesielle organismen ekstraheres ved å bruke en riktig DNA-ekstraksjonsprotokoll. Deretter bør det ekstraherte dobbelttrådete DNA denatureres for å oppnå separerte enkelttråder. Det neste trinnet inkluderer bruk av en PCR-reaksjon for å lage kopier av genet av interesse. Videre inneholder PCR-blandingen nødvendige primere, nukleotider, DNA-polymeraseenzym, mal-DNA og andre ingredienser. På slutten av PRC-programmet skjer amplifisering av genet av interesse.
Figur 01: Genforsterkning
I tillegg er genamplifikasjon et første trinn i deteksjonen av en spesifikk sekvens, identifisering av en organisme, diagnostisering av sykdommer og opprettelse av genbiblioteker osv.
Hva er genkloning?
Genkloning er en metode innen genteknologi for å lage genbiblioteker eller lage mange kopier av genet av interesse. Denne prosessen innebærer å lage et rekombinant plasmid og transformere det rekombinante plasmidet til en vertscelle, spesielt en bakteriecelle. Klon er en identisk kopi av den opprinnelige organismen eller et molekyl. Genkloning kan lage tusenvis av genkloner.
Figur 02: Genkloning
Når genet av interesse er identifisert, kan det separeres fra genomet til en bestemt organisme ved å begrense det med spesifikke restriksjonsenzymer. Ved å bruke det samme restriksjonsenzymet bør plasmider (vektorer) åpnes for å sette inn genfragmentet. Deretter transformeres det rekombinante plasmidet til en vertsbakterie ved bruk av forskjellige metoder som elektroporering. Noen av de rekombinante plasmidene går inn i vertsbakterieceller. Ved hjelp av et antibiotikum kan de transformerte bakteriene selekteres, isoleres og dyrkes i ferske medier. Dermed hjelper denne teknikken til å få millioner av genkloner.
Hva er likhetene mellom genamplifikasjon og genkloning?
- Genamplifikasjon og genkloning er to molekylærbiologiske teknikker.
- I begge disse teknikkene multipliseres en bestemt DNA-sekvens eller et gen i millioner eller tusenvis.
- I tillegg er begge teknikkene av største betydning for mange vitenskapelige områder.
Hva er forskjellen mellom genamplifikasjon og genkloning?
Genamplifikasjon er en prosess som lager kopier av et bestemt gen ved å bruke in vitro-metoden k alt PCR. På den annen side er genkloning en prosess som lager kopier av et bestemt gen ved å bruke in vivo-metoden via å konstruere rekombinante vektorer og multiplisere dem i levende organismer. Så dette er nøkkelforskjellen mellom genamplifisering og genkloning. Videre tar genamplifisering bare noen få timer mens genkloning tar flere dager å fullføre. Derfor kan vi også betrakte dette som en forskjell mellom genamplifisering og genkloning. Dessuten viser genamplifikasjonsprosessen færre feil, mens genkloningsprosessen viser flere feil.
Følgende infografikk oppsummerer forskjellen mellom genamplifikasjon og genkloning.
Summary – Genamplification vs Gen Cloning
Genamplifikasjon er prosessen med å lage kopier av det ønskede genet ved bruk av polymerasekjedereaksjon under in vitro-forhold, mens genkloning er prosessen med å lage kopier av et gen av interesse ved å bruke et rekombinant DNA-molekyl og en levende organisme/vert bakterie. Dermed er dette den grunnleggende forskjellen mellom genamplifikasjon og genkloning.
