Nøkkelforskjellen mellom tot alt celletall og levedyktig celletall er at det totale celletall estimerer alle celler inkludert både levende og døde mikrobielle celler i en prøve, mens levedyktig celletall estimerer bare de levende mikrobielle cellene i en prøve.
Telle antall organismer i en populasjon anses som nødvendig for de fleste eksperimentelle arbeid. Derfor prøver vi å analysere antall mikrober i en prøve ved å bruke direkte og indirekte metoder. Direkte målinger involverer metoder som teller celletall direkte. Indirekte målinger innebærer å måle en eller annen parameter som kan relateres til celleantall som celletetthet, tørrvekt osv. Noen metoder kvantifiserer bare de levende mikrobielle cellene i en prøve. Levedyktig celletall er en slik metode. Direkte mikroskopiske tellinger kvantifiserer alle celler i et kjent volum av medium/prøve ved hjelp av et mikroskop. Derfor teller den både levende og døde celler. Det er en type tot alt celletall.
Hva er tot alt antall celler?
Tot alt celletall er metoden som går ut på å telle alle celler i et kjent volum av medium/prøve ved hjelp av et mikroskop og et tellekammer (hemocytometer). I motsetning til levedyktige tellinger telles både levende og døde celler. Derfor er dette en total telling med mindre en levedyktighetsflekk påføres under observasjonen. Ved mikroskopi observeres cellene direkte under mikroskopet og telles. Den bruker en cellesuspensjon som består av mikrobielle celler. For enkel telling og nøyaktige målinger kan fortynning av prøven gjøres. I svært høye/lave konsentrasjoner av celler er det en vanskelig oppgave å oppnå det totale celletall ved hjelp av et mikroskop.
Figur 01: Tellekammer – Hemocytometer
Tellekamre er enkle, rimelige og raske til å ta et tot alt antall celler. Det viktigste er at tellekamre er nyttige for å telle både eukaryoter og prokaryoter. Vi teller celler i utvalgte firkanter med kjent volum for å kvantifisere tot alt celletall.
Hva er levedyktig celletall?
Tall levedyktige celler er en metode for å telle levende mikrobielle celler i en prøve. Den teller bare levende celler i prøven. Antall levedyktige tallerkener, membranfiltrering og mest sannsynlig antall er få teknikker for levedyktige celler. Disse tilnærmingene er vekstbaserte. Levedyktig platetellingsmetode er en kraftig metode som brukes i mange mikrobiologiske felt, inkludert mat- og meierimikrobiologi, medisinsk mikrobiologi, miljømikrobiologi, mikrobiell genetikk, utvikling av vekstmedier og bioteknologi.
Den vanligste måten å telle levedyktige bakterier på er å bruke en prøve som er i stand til å danne kolonier på et agarmedium. Det er to hovedmåter å utføre en tallerkentelling: spredeplateteknikk og helleplateteknikk. Et kjent prøvevolum kan enten spres på overflaten av en agarplate, eller blandes inn i agaren. Platen inkuberes deretter, og koloniene som oppstår telles. Antall kolonier er relatert til antall mikroorganismer i den opprinnelige prøven. Levedyktige tellinger måler bare de cellene som er levende og vokser.
Figur 02: Antall levedyktige tallerkener
Most probable number (MPN) er et alternativ til platetellingsmetoder for å estimere populasjonstettheten til levedyktige celler. Den teller organismer som vokser i flytende kultur og er dermed en overveiende bakteriologisk teknikk. Det er spesielt nyttig for lave konsentrasjoner av organismer, f.eks. melk, drikkevann.
Membranfiltreringsteknikk er mer egnet når mikrober er veldig fortynnede som i en bys vannforsyning. Det gjøres ganske enkelt ved å føre et kjent volum av væsken gjennom et filter og inkubere det på et næringsmedium. Kolonier som utvikles på filteret telles, og bakteriene per milliliter av prøven beregnes.
Hva er likhetene mellom tot alt antall celler og antall levedyktige celler?
- Tot alt celletall og levedyktige celler er to typer mikrobielle teknikker som kvantifiserer celler.
- De er ofte brukte oppregningsteknikker i mikrobiologiske laboratorier.
Hva er forskjellen mellom tot alt antall celler og antall levedyktige celler?
Tot alt celletall teller alle levende og døde mikrobielle celler i en prøve. I kontrast teller levedyktig celletall bare de levende cellene i en prøve. Så dette er nøkkelforskjellen mellom tot alt celletall og levedyktig celletall. Tot alt celletall er uavhengig av veksten av kolonier på agarplater, mens levedyktige celler er en vekstbasert teknikk og det avhenger av veksten av mikrobielle kolonier på agarplater.
Infografikken nedenfor oppsummerer forskjellen mellom tot alt antall celler og antall levedyktige celler.
Sammendrag – Tot alt celletall vs. levedyktig celletall
Tot alt celletall teller både levende og døde mikrobielle celler mens levedyktig celletall kun teller de levende cellene. Dermed er dette nøkkelforskjellen mellom tot alt celletall og levedyktig celletall. Dessuten er antall levedyktige celler en vekstbasert teknikk, i motsetning til tot alt celletall. Dessuten krever det inkubering av plater til man får de synlige koloniene. Antall levedyktige plater, MPN og membranfiltrering er få teknikker for antall levedyktige celler, mens direkte mikroskopi og bruk av hemocytometer er to teknikker for tot alt celletall.
