Nøkkelforskjellen mellom elektroporasjon og mikroinjeksjon er at elektroporering er en teknikk som bruker en elektrisk høyspenningspuls for å levere DNA til vertsceller, mens mikroinjeksjon er en teknikk som bruker en glassnål eller mikropipette med fin spiss for å levere DNA inn i vertsceller.
Transformasjon er prosessen der fremmed DNA overføres til vertsceller. Ved transformasjon kan den genetiske sammensetningen til organismen endres. Det finnes forskjellige kjemiske, biologiske og fysiske transformasjonsmetoder. Noen er direkte metoder, mens noen er indirekte metoder. Elektroporering og mikroinjeksjon er to fysiske metoder som er direkte transformasjonsmetoder. Elektroporering bruker et elektrisk felt for å indusere mikroskopiske porer i biologiske cellemembraner for å inkorporere DNA i vertsceller. Mikroinjeksjon, derimot, leverer DNA direkte ved hjelp av en mikropipette eller en glassnål med fin spiss.
Hva er elektroporasjon?
Elektroporasjon er en transformasjonsteknikk som leverer DNA til planteceller og protoplaster. Denne teknikken bruker en høyspent elektrisk puls. Plantematerialer inkuberes i en bufferløsning med DNA. Deretter utsettes løsningen for en elektrisk høyspenningspuls. Høyspenningsinduserte porer skapes i plantecellemembraner, og gjennom disse porene migrerer DNA inne i cellene og integreres med plantegenomisk DNA. Effektiviteten til denne metoden avhenger av plantematerialer og behandlingsforhold.
Figur 01: Elektroporering
Når transformasjonen gjøres ved hjelp av elektroporering, mottar bare 40 til 50 % av cellene DNA. Dessuten kan bare 50 % av de transformerte cellene overleve under denne metoden. Imidlertid er denne metoden enkel å utføre og endrer ikke den biologiske strukturen eller funksjonen til celler. Dessuten kan den brukes til et bredt spekter av celler.
Hva er mikroinjeksjon?
Mikroinjeksjon er en transformasjonsteknikk som er spesielt nyttig når man introduserer DNA i store celler. Denne metoden bruker en glassnål med fin spiss eller en mikropipette for å levere DNA til planteprotoplaster eller dyreceller (oocytter, egg og embryoer). Faktisk er denne metoden mer egnet for å lage transgene dyr som mus. I denne metoden inkorporeres DNA direkte i kjernen eller cytoplasmaet.
I likhet med elektroporering er mikroinjeksjon en direkte transformasjonsteknikk. Mikroinjeksjon utføres under et spesialisert mikroskopoppsett. Datastyrt kontroll av å holde pipette, nål, mikroskop scene og videoteknologi har økt effektiviteten til denne teknikken. Ved injeksjon av DNA kan et fargestoff brukes til å enkelt identifisere transformerte celler. Derfor er det ikke nødvendig å bruke en egen metode for å identifisere transformerte celler. Det viktigste er at mikroinjeksjonsprosedyren ikke krever et markørgen.
Figur 02: Mikroinjeksjon
I tillegg er denne metoden veldig effektiv og reproduserbar. Denne metoden er imidlertid kostbar, tidkrevende og krever dyktig personell. Dessuten kan bare et lite antall celler behandles med denne metoden.
Hva er likhetene mellom elektroporering og mikroinjeksjon?
- Både elektroporering og mikroinjeksjon er to typer transformasjonsteknikker.
- Disse metodene leverer DNA til planteceller og protoplaster.
- De er direkte metoder.
- Dessuten er de fysiske eller mekaniske metoder.
- Begge metodene er nyttige når man produserer transgene planter og dyr.
Hva er forskjellen mellom elektroporering og mikroinjeksjon?
Elektroporasjonsteknikk bruker et elektrisk felt for å introdusere DNA, mens mikroinjeksjonsteknikk er en mikropipette eller en glassnål med fin spiss for å introdusere DNA. Dermed er dette nøkkelforskjellen mellom elektroporering og mikroinjeksjon. Dessuten brukes elektroporering mest for planteceller og protoplaster, mens mikroinjeksjon mest brukes til dyreceller. Dessuten er elektroporering ikke så tidkrevende som mikroinjeksjon.
Infografien nedenfor oppsummerer forskjellene mellom elektroporering og mikroinjeksjon i tabellform.
Sammendrag – Elektroporering vs mikroinjeksjon
Elektroporasjon og mikroinjeksjon er to fysiske metoder for genoverføring. Elektroporering bruker et høyspent elektrisk felt mens mikroinjeksjon bruker en glassnål eller mikropipette. Dermed er dette nøkkelforskjellen mellom elektroporering og mikroinjeksjon. Begge metodene introduserer imidlertid eksogent DNA direkte i vertsceller.
