Nøkkelforskjellen mellom C18- og fenylkolonner er at separasjonen gitt av C18 HPLC-kolonnene er lavere sammenlignet med fenyl-HPLC-kolonner.
C18-kolonne i HPLC er en kolonne som bruker et C18-stoff som stasjonær fase, mens fenylkolonnen er en kolonnetype som finnes i enkelte HPLC-instrumenter. Den har korte alkylfenylligander som er kovalent bundet til silikaoverflaten.
Hva er en C18-kolonne?
En C18-kolonne i HPLC er en kolonne som bruker et C18-stoff som stasjonær fase. Derfor er disse kjent som C18 HPLC-kolonner. Disse er nyttige i miljøvitenskap og kjemisk analyse. Videre er C18 HPLC-kolonner viktige i farmasøytisk industri og miljøvitenskap for analyse av individuelle deler av kjemiske blandinger.
Figur 01: En typisk HPLC-kolonne
Vanligvis bruker disse C18-kolonnene oktaldecylsilan, og dette stoffet inneholder 18 karbonatomer som er bundet til silika. Dette betyr at denne forbindelsen har flere karbonatomer og en lengre karbonkjede enn C-8. De ekstra karbonatomene i disse karbonkjedene lager et stort overflateareal for den mobile fasen å bevege seg over.
Generelt kan vi bruke en C18-kolonne i HPLC som en omvendt fasekolonne. Dette er fordi denne typen kolonne bruker mer polare løsningsmidler (f.eks. vann, metanol og acetonitril). I tillegg er den stasjonære fasen et upolart hydrokarbon (C18).
Hva er en fenylkolonne?
En fenylkolonne er en type kolonne som kan finnes i enkelte HPLC-instrumenter som har korte alkylfenylligander kovalent bundet til silikaoverflaten. I moderne HPLC-kolonner kan vi imidlertid finne difenylfaser som er utviklet for å forbedre pi-pi-interaksjonen. Det er en kort alkylkobling, så fenylkolonnene mangler vanligvis hydrofob retensjon, og den viser lav hydrolytisk stabilitet.
Figur 02: En prøve på HPLC-pumpe
Fenylkolonner er svært vellykkede med å separere posisjonelle isomerer, tokoferoler, flavonoider, polynukleære aromater, nitroaromatiske forbindelser, aktive farmasøytiske ingredienser og andre relaterte forbindelser.
Hva er forskjellen mellom C18 og Phenyl Column?
HPLC-instrumentet har en kolonne som er nyttig for å separere komponenter i en blanding. Det finnes forskjellige typer kolonner i HPLC-instrumenter. C18-kolonne og fenylkolonne er to slike kolonner. Hovedforskjellen mellom C18 og fenylkolonne er at separasjonen gitt av C18 HPLC-kolonnene er lavere sammenlignet med fenyl-HPLC-kolonner. Dessuten er oppløsningen gitt av fenylkolonnen høyere sammenlignet med C18-kolonnen. I tillegg er den stasjonære fasen av C18-kolonnen en C18-forbindelse som oktaldecylsilan, mens den stasjonære fasen av fenylkolonnen er laget av korte alkylfenylligander som er kovalent bundet til silikaoverflaten.
Infografien nedenfor presenterer forskjellene mellom C18 og fenylkolonne i tabellform for side ved side-sammenligning.
Sammendrag – C18 vs Phenyl Column
C18-kolonnen i HPLC er en kolonne som bruker et C18-stoff som stasjonær fase. I mellomtiden er fenylkolonnen en type kolonne som kan finnes i noen HPLC-instrumenter som har korte alkylfenylligander som er kovalent bundet til silikaoverflaten. Hovedforskjellen mellom C18- og fenylkolonner er at separasjonen gitt av C18 HPLC-kolonnene er lavere enn for fenyl-HPLC-kolonner.
