Nøkkelforskjellen mellom gel- og papirelektroforese er at separasjonsmediet i gelelektroforese er agarosegel, mens separasjonsmediet i papirelektroforese er en papirstrimmel nedsenket i en bufferløsning.
Elektroforese er en analytisk teknikk som er nyttig for å analysere en prøve ved å bruke de elektriske egenskapene til de kjemiske artene som er tilstede i den prøven. Her kan vi observere bevegelsen til det dispergerte oppløste stoffet i det analyserte mediet. Derfor kan vi bestemme bevegelsen til den kjemiske arten i forhold til mediet. Gelelektroforese og papirelektroforese er to viktige teknikker innen kjemi.
Hva er gelelektroforese?
Gelelektroforese kan beskrives som en metode for separasjon og analyse av makromolekyler avhengig av størrelse og ladning. Makromolekyler i denne sammenheng kan referere til DNA, RNA, proteiner og deres fragmenter. Denne metoden er nyttig i klinisk kjemi for separering av proteiner etter ladning eller størrelse. I tillegg er det viktig innen biokjemi og molekylærbiologi for separasjon av en blandet populasjon av DNA- og RNA-fragmenter etter deres lengde for å estimere størrelsen på DNA- og RNA-fragmenter. Dessuten kan vi bruke den til å skille proteiner etter ladningen.
Figur 01: Gelelektroforeseinstrumentering
Vi kan skille nukleinsyremolekyler ved å bruke et elektrisk felt for bevegelse av negativt ladede molekyler gjennom en matrise av agarose eller andre stoffer. I denne prosessen kan kortere molekyler bevege seg raskere mens lengre molekyler beveger seg saktere. Dette er fordi kortere molekyler lett kan bevege seg gjennom gelporene. Vi kaller denne bevegelsen av fragmenter gjennom porene "sikting". Dessuten kan vi vanligvis ikke skille proteiner i henhold til deres størrelse fra denne metoden fordi proteiner er for store til å bli siktet fra gelporene. Vi kan imidlertid bruke denne prosessen til å skille nanopartikler.
Hva er papirelektroforese?
Papirelektroforese kan beskrives som separasjon ved bruk av filterpapir som er dynket i bufferløsning. Vanligvis bruker vi dietylbarbitursyre og barbitursyre oppløst i alkali som bufferløsning. pH-verdien til denne bufferløsningen er pH 8,6. Dessuten kan vi legge en liten mengde serum på papiret, og en likestrøm føres deretter gjennom det i flere timer.
Papirelektroforese er viktig for separering av små, ladede molekyler, inkludert aminosyrer og små proteiner. Her må vi fukte en stripe med filterpapir med buffer og senke endene av stripen i bufferreservoarer som inneholder elektroder. Den første personen som ble rapportert som brukte denne metoden var Konig i 1937. I funnene sine introduserte han en papirvåt buffer for soneelektroforese og foreslo også UV-deteksjon.
Hva er forskjellen mellom gel- og papirelektroforese?
Elektroforese er en analytisk teknikk som er nyttig for å analysere en prøve ved å bruke de elektriske egenskapene til de kjemiske artene som er tilstede i den prøven. Gelelektroforese og papirelektroforese er to viktige elektroforesemetoder. Hovedforskjellen mellom gel- og papirelektroforese er at separasjonsmediet i gelelektroforese er agarosegel, mens separasjonsmediet i papirelektroforese er en papirstrimmel nedsenket i en bufferløsning.
Nedenfor er en oppsummering av forskjellen mellom gel- og papirelektroforese i tabellform for sammenligning side ved side.
Sammendrag – Gel vs papirelektroforese
Gelelektroforese er metoden for separasjon og analyse av makromolekyler avhengig av størrelse og ladning, mens papirelektroforese er separasjon ved bruk av filterpapir-trips dynket i bufferløsning. Hovedforskjellen mellom gel- og papirelektroforese er at separasjonsmediet i gelelektroforese er agarosegel, mens separasjonsmediet i papirelektroforese er en papirstrimmel nedsenket i en bufferløsning.
