Key Difference – Transformants vs Recombinants
Rekombinasjon og transformasjon er to avgjørende trinn i genteknologi, hvor egenskapene til en organisme bevisst modifiseres ved å manipulere dens genetiske materiale. Rekombinasjon er en prosess der fremmed DNA inkorporeres i et vektorgenom og rekombinant DNA-molekyl dannes. Transformasjon er neste trinn der rekombinante molekyler legges inn i vertsorganismen. Vertscellen eller organismen letter ekspresjon av det rekombinante molekylet. Nøkkelforskjellen mellom transformanter og rekombinanter er at transformanter er cellene eller organismene som tar rekombinant molekyl inne og letter ekspresjon, mens rekombinanter er vektorene som tillater innsetting av det fremmede DNA i genomet og transport inn i vertstransformanter for ekspresjon.
Hva er transformanter?
Transformanter er cellene eller organismene der rekombinant DNA tas opp for uttrykket. Bakterier brukes ofte som vertsorganismer i genteknologi siden de er enkle å dyrke, formere og håndtere under laboratorieforhold og transformasjonsprosessen er enkel sammenlignet med andre organismer. Den mest populære vertsbakterien som brukes i genteknologi er bakterien E coli.
Under transformasjonsprosessen induseres vertsceller til å ta opp rekombinantene. Noen vertsceller tar imidlertid ikke opp rekombinante molekyler. De er kjent som ikke-transformanter, og cellene som inneholder rekombinante DNA-molekyler inni er kjent som transformanter. Seleksjon av transformanter fra ikke-transformanter gjøres ved å bruke selekterbare markører i molekylærbiologi. Selekterbare markører settes inn i vektorgenomet sammen med DNA-innskuddet. Vanlig brukte selekterbare markører er antibiotikaresistente gener. Markørgener letter differensieringen av transformanter og fortsetter prosessen. Etter transformasjonsprosessen dyrkes bakterien i et medium som inneholder antibiotika. Bare transformantene er i stand til å vokse på det mediet siden de har rekombinantene inne.
Når det rekombinante DNA-molekylet er transformert inne i vertsorganismen, kan det fremmede DNA enten integreres i vertscellens genom eller forbli ikke-integrert i cytoplasmaet. Imidlertid skjer uttrykket og replikasjonen av det fremmede DNA i vertsorganismen og gir det ønskede resultatet fra prosessen.
Hva er rekombinanter?
En rekombinant er en organisme eller en celle som har rekombinert genom som inneholder fremmed DNA. Rekombinanter er et resultat av den genteknologiske prosessen. De er kunstig konstruert in vitro ved å sette inn genene av interesse og modifisere genomet. Ofte fungerer bakterieplasmider og bakteriofager som rekombinanter i genteknologi. Den har kimærer av forskjellige DNA-er. Rekombinant DNA-molekyl bærer fremmed DNA til vertsorganismen og får det til å uttrykke og danne det ønskede produktet.
Rekombinante molekyler er konstruert ved bruk av restriksjonsendonukleaser og DNA-ligaser. Det ønskede DNA-fragmentet separeres fra den opprinnelige organismen og settes inn i vektoren for å gjøre det rekombinante for transformasjon. Kutting av genet av interesse og åpning av vektororganismen bør gjøres ved å bruke det samme restriksjonsenzymet for å lage kompatible klebrige ender for å binde dem sammen. Når det fremmede DNA er inkorporert i vektorgenomet, er det kjent som rekombinant eller det rekombinante DNA-molekylet.
Figur 02: Rekombinant DNA
Hva er forskjellen mellom transformanter og rekombinanter?
Transformanter vs rekombinanter |
|
| Transformanter er cellene som har et rekombinant DNA-molekyl inni. | Rekombinanter er bærermolekylene som har fremmed DNA satt inn i eget genom. |
| Uttrykk for utenlandsk DNA | |
| De er vertscellene som er i stand til å uttrykke det rekombinante DNA. | De skal være i stand til å replikere seg selv i vertsorganismen. |
| Utvalg | |
| Celler som enkelt kan dyrkes og formere seg, velges som vertsceller. | De må være lett å trekke ut og bør inneholde valgbare markører. |
Summary – Transformants vs Recombinants
Transformanter er cellene eller organismene med rekombinante DNA-molekyler inni seg. Rekombinanter er organismene eller cellene som har gjennomgått genetisk rekombinasjon og har fremmed DNA i genomene. Bakterieceller brukes ofte som vertsceller for transformasjon og plasmider og bakteriofager brukes ofte som vektorer i rekombinant DNA-teknologi. Dette er forskjellen mellom transformanter og rekombinanter.
