Nøkkelforskjell – CFU vs MPN
Colony forming unit (CFU) og Most probable number (MPN) er to metoder som brukes til å telle opp mikroorganismer i prøver. Begge parameterne brukes til å oppdage vannkvalitet og fekale indikatorbakterier i vannprøver. Kolonidannende enhet er et mål som brukes til å telle opp antall levedyktige bakterieceller eller soppceller i spesifikt volum eller vekt av en gitt prøve. Standardenheten for denne parameteren er CFU/ml eller CFU/g. Mest sannsynlige tall er en annen enhet som brukes til å måle antall levedyktige bakterieceller i en væskeprøve. Hovedforskjellen mellom CFU og MPN er at CFU beregnes fra bakterie- og soppkoloniene som vokser på en solid agarplate, mens MPN beregnes fra levedyktige bakterier som vokser i et flytende medium.
Hva er CFU?
Colony forming unit (CFU) er en parameter som måler antall levedyktige bakterie- eller soppceller i en gitt prøve. Metoden som teller kolonidannende enheter refereres til som standard platetelling. De levedyktige koloniene som vises på agarplatene er uttrykt som CFU per 1 ml (kolonidannende enhet per milliliter) av prøven for væsker eller CFU per 1 g (kolondiannende enhet per ett gram) av prøven for faste stoffer.
Det er to vanlige metoder som brukes for å måle CFU i en prøve. De er spredde platemetoden og helleplatemetoden. Disse to metodene støttes av en teknikk som kalles seriefortynning. Seriefortynnede prøver gjør det mulig å oppnå et tellbart antall kolonier på agaroverflaten. Et kjent prøvevolum kan spres på overflaten av en agarplate, eller blandes med agar og helles på en plate. Platen inkuberes deretter og koloniene som oppstår telles. Antall kolonier er relatert til antall mikroorganismer i den opprinnelige prøven. Platene som viser for mange kolonier eller for få kolonier er ekskludert fra telling fordi resultatene kanskje ikke er statistisk nøyaktige på disse platene. Statistisk sett er det beste området 30 – 300 kolonier på en agarplate. Derfor bør de riktige platene velges for nøyaktig oppregning. Seriell fortynning utføres for funksjonen ovenfor.
Når du teller antall levedyktige kolonier på plater, kan CFU/ml beregnes ved å bruke følgende ligning.
CFU per ml originalprøve=antall kolonier på en plate X fortynningsfaktor
Fortynningsfaktor=(1/ Fortynning av platen)
For eksempel, hvis du får 149 kolonier på platen med 10-4 fortynningen, kan antall bakterier i 1 ml av den opprinnelige prøven beregnes som følger:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 eller 1490000
=1. 49 x 106
Figur 01: Kolonidannende enhet
Hva er MPN?
Det mest sannsynlige tallet er et alternativt mål til CFU/ml. MPN estimerer også levedyktige celler i en væskeprøve. Den teller organismer som vokser i en flytende kultur og er en overveiende bakteriologisk teknikk. Denne metoden er spesielt nyttig for prøver som inneholder lave konsentrasjoner av bakterieceller; for eksempel melk, drikkevann etc. MPN-verdi er uttrykt for 100 ml volum. MPN er avhengig av en statistisk metode basert på sannsynlighetsteori. Det er statistiske tabeller laget for å finne MPN-verdier per 100 ml av prøven. Disse tabellene viser resultatene ved 95 % konfidensgrenser.
MPN-verdien beregnes etter å ha utført en teknikk som kalles flerrørsfermenteringsmetode. Tre sett med rør som inneholder et egnet kulturmedium inokuleres med tre forskjellige volumer av prøven, for eksempel 10 ml, 1 ml og 0.1 ml og inkubert for vekst. Etter inkubasjonsperioden gis rørene + (positive) eller – (negative) for tilstedeværelse eller fravær av vekst. Mønsteret av positive og negative resultater sammenlignes deretter med en MPN-tabell med statistiske sannsynligheter for å estimere antall mikroorganismer. Deretter gis MPN-verdi for 100 ml av prøven. MPN er mye brukt for å oppdage koliforme bakterier som finnes i vannprøver.
Figur 02: MPN-tabell
Hva er forskjellen mellom CFU og MPN?
CFU vs MPN |
|
| CFU er et mål som brukes til å uttrykke antall levedyktige bakterie- eller soppkolonier i en gitt prøve. | MPN er et alternativt mål til CFU og måler antall levedyktige bakterieceller i en væskeprøve. |
| Unit | |
| CFU/ml eller CFU/g | MPN/100 ml |
| Beregning | |
| CFU beregnes ved å telle antall kolonier dyrket på agarplater. | MPN beregnes ved å sammenligne positive og negative mønstre av rørene med MPN statistisk tabell. |
| Seriell fortynningsteknikk | |
| Seriefortynning utføres før prøvene plasseres på agarplater. | Seriell fortynning utføres norm alt ikke når MPN beregnes |
| Methods | |
| Spredeplatemetoden og helleplatemetoden er to typer metoder for å oppnå CFU. | Fermentering med flere rør er metoden som utføres for å oppnå MPN-verdi. |
Sammendrag – CFU vs MPN
Måling av mikrobiell vekst er nødvendig av mange grunner. I matforedlingsanlegg er det nødvendig å måle nivået og typen av mikroorganismer i mat. I næringsmiddelindustrien og medisin er det nødvendig å sikre at steriliseringsbehandlinger blir effektivt brukt. I avløpsrenseanlegg er det påkrevd å ta mikrobielteller rutinemessig. Ved optimalisering av prosedyre i molekylærbiologi er det nødvendig å måle antall kolonier på plater. Derfor er det forskjellige oppregnings- og vekstmålingsmetoder tilgjengelig. CFU og MPN er to slike metoder som er mye brukt på forskjellige felt. CFU er et mål på antall levedyktige bakterie- og soppkolonier som er tilstede i en gitt prøve. Det beregnes ved å bruke standard platetellingsmetode eller levedyktig platetellingsmetode. MPN er et annet mål som uttrykker antall bakterieceller som er tilstede i et gitt volum av væskeprøven. Den beregnes ved å bruke flerrørsfermenteringsmetode og MPN-tabell. Dette er forskjellen mellom CFU og MPN.
Last ned PDF-versjon av CFU vs MPN
Du kan laste ned PDF-versjon av denne artikkelen og bruke den til offline-formål i henhold til sitatnotater. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom CFU og MPN.
