Nøkkelforskjell – UV vs synlig spektrofotometer
Det er ingen forskjell mellom UV og synlig spektrofotometer fordi begge disse navnene brukes for samme analyseinstrument.
Dette instrumentet er vanligvis kjent som UV-synlig spektrofotometer eller ultrafiolett-synlig spektrofotometer. Dette instrumentet bruker absorpsjonsspektroskopiteknikken i ultrafiolett og synlig spektralområde.
Hva er UV-spektrofotometer (eller synlig spektrofotometer)?
UV-spektrofotometer, også kjent som synlig spektrofotometer, er et analytisk instrument som analyserer væskeprøver ved å måle evnen til å absorbere stråling i ultrafiolette og synlige spektralområder. Dette betyr at denne absorpsjonsspektroskopiske teknikken bruker lysbølgene i synlige og tilstøtende områder i det elektromagnetiske spekteret. Absorpsjonsspektroskopien omhandler eksitasjon av elektroner (bevegelse av et elektron fra grunntilstand til eksitert tilstand) når atomene i en prøve absorberer lysenergi.
Figur 01: Et UV-synlig spektrofotometer
De elektroniske eksitasjonene finner sted i molekyler som inneholder pi-elektroner eller ikke-bindende elektroner. Hvis elektronene til molekylene i prøven lett kan eksiteres, kan prøven absorbere lengre bølgelengder. Som et resultat kan elektronene i pi-bindinger eller ikke-bindende orbitaler absorbere energi fra lysbølger i UV eller synlig område.
De største fordelene med UV-Synlig spektrofotometer inkluderer enkel betjening, høy reproduserbarhet, kostnadseffektiv analyse osv. I tillegg kan det bruke et bredt spekter av bølgelengder for å måle analytter.
Beer-Lamberts lov
Beer-Lamberts lov gir absorpsjon av en viss bølgelengde av en prøve. Den sier at absorpsjonen av bølgelengder av en prøve er direkte proporsjonal med konsentrasjonen av analytten i prøven og banelengden (avstanden som er tilbakelagt av lysbølgen gjennom prøven).
A=εbC
Hvor A er absorbansen, ε er absorptivitetskoeffisienten, b er veilengden og C er konsentrasjonen av analytten. Det er imidlertid noen praktiske hensyn knyttet til analysen. Absorpsjonskoeffisienten avhenger bare av analyttens kjemiske sammensetning. Spektrofotometeret bør ha en monokromatisk lyskilde.
Grunnleggende deler av det UV-synlige spektrofotometeret
- En lyskilde
- En prøveholder
- Diffraksjonsgitter i en monokromator (for å skille forskjellige bølgelengder)
- Detektor
Et UV-synlig spektrofotometer kan bruke en enkelt lysstråle eller dobbel stråle. I enkeltstrålespektrofotometre passerer alt lyset gjennom prøven. Men i dobbeltstrålespektrofotometer deler lysstrålen seg i to fraksjoner, og en stråle passerer gjennom prøven mens den andre strålen blir referansestrålen. Dette er mer avansert enn å bruke en enkelt lysstråle.
Bruk av UV-synlig spektrofotometer
Det UV-synlige spektrofotometeret kan brukes til å kvantifisere de oppløste stoffene i en løsning. For å kvantifisere analytter som overgangsmetaller og konjugerte organiske forbindelser (molekyler som inneholder alternerende pi-bindinger), kan man bruke dette instrumentet. Vi kan bruke dette instrumentet til å studere løsninger, men noen ganger bruker forskere denne teknikken til å analysere faste stoffer og gasser også.
Sammendrag – UV vs Visible Spectrophotometer
Det UV-synlige spektrofotometeret er et instrument som bruker de absorpsjonsspektroskopiske teknikkene for å kvantifisere analyttene i en prøve. Det er ingen forskjell mellom UV og synlig spektrofotometer fordi begge navnene refererer til samme analyseinstrument.