Nøkkelforskjellen mellom kloningsvektor og ekspresjonsvektor er at kloningsvektor bærer et fremmed DNA-fragment inn i vertscellen mens ekspresjonsvektor letter ekspresjonen av gener til proteiner.
Vektor er et viktig begrep innen molekylærbiologi. I rekombinant DNA-teknologi er hovedrollen til en vektor å gi en transportmåte til en nyttig DNA-fraksjon som skal settes inn i en vertscelle. Dessuten er det et DNA-molekyl som brukes til å bære et fremmed DNA-fragment kunstig inn i en vertscelle for å bli uttrykt eller replikert. Mest brukte vektorer er plasmider, virale vektorer, kosmider og kunstige kromosomer. Kloningsvektor og ekspresjonsvektor er to typer vektorer klassifisert basert på deres applikasjoner.
Hva er en kloningsvektor?
En kloningsvektor er en brøkdel av DNA som kan brukes til å sette inn et fremmed DNA-molekyl og har evnen til å settes inn i en vert for kloningsformål. Et ideelt kjennetegn ved en kloningsvektor er enkel innsetting/fjerning av DNA-fragmentet ved restriksjonsenzymbehandling og ligeringsenzymbehandling. I dette aspektet er ofte brukte kloningsvektorer de genetisk konstruerte plasmidene.
Figur 01: Kloningsvektor
En kloningsvektor bør ha et multippelt kloningssted, et valgbart markørgen og et reportergen. Hensikten med et kloningssted er å gi et sted for kloning. Et selekterbart markørgen hjelper til med å identifisere vellykkede rekombinanter etter kloning, og et reportergen tillater screening og identifisering av riktig rekombinant blant rekombinantene etter kloning. Kloningsvektoren hjelper ikke nødvendigvis til å uttrykke et protein som det fremmede DNA koder for. Dermed er det eneste formålet med kloningsvektoren å bære fremmed DNA til verten.
Hva er en uttrykksvektor?
Ekspresjonsvektor, også k alt ekspresjonskonstruksjon, er en type vektor som brukes for ekspresjon av proteiner inne i vertscellen. Som enhver vektor bør denne også inneholde hoveddelene et multippelt kloningssted, et markørgen og et reportergen. Vektoren introduserer et nytt gen i verten og ved hjelp av vertens proteinsyntesemekanisme lar den genet uttrykkes i verten. Dessuten er dens første fokus å lage stabil m-RNA og derved lage proteiner. Et godt eksempel er kommersiell produksjon av insulin. Insulingenet introduseres til et bakterieplasmid og settes tilbake i E.coli-bakterier som lar plasmidene formere seg og lar E. coli vokse, og skiller ut insulin som kan samles opp og brukes.
Figur 02: Uttrykksvektor
Videre bør en ekspresjonsvektor ha en sterk promoterregion, en korrekt translasjonsinitieringssekvens og et korrekt terminatorkodon og en sekvens. Ekspresjonsvektorer har mange bruksområder for å produsere peptider og proteiner for den farmasøytiske industrien, for eksempel produksjon av insulin, veksthormon, antibiotika, vaksiner, antistoffer. Dessuten hjelper ekspresjonsvektorer til enzymproduksjon i mat- og klesindustri. Ikke bare det, ekspresjonsvektorer er essensielle for å produsere transgene planter som gullris, insektresistente planter, herbicidresistente planter, etc.
Hva er likhetene mellom kloningsvektor og uttrykksvektor?
- Kloningsvektor og ekspresjonsvektor er to typer vektorer vi bruker i rekombinant DNA-teknologi og genteknologi.
- Begge inneholder et markørgen og et reportergen.
- Dessuten består de av flere kloningssider.
- De har også et opphav til replikering og evnen til å replikere seg selv.
Hva er forskjellen mellom kloningsvektor og uttrykksvektor?
En kloningsvektor er et lite DNA-molekyl som bærer et fremmed DNA-fragment inn i vertscellen mens ekspresjonsvektor er en type vektor som letter introduksjon, ekspresjon av gener og produksjon av proteiner. Så dette er nøkkelforskjellen mellom kloningsvektor og ekspresjonsvektor. Videre er en annen betydelig forskjell mellom kloningsvektor og ekspresjonsvektor at en kloningsvektor introduserer et fremmed DNA-fragment i en vert mens ekspresjonsvektorer uttrykker det introduserte genet ved å produsere det relevante proteinet.
I tillegg består kloningsvektor av et replikasjonsorigo, restriksjonssteder og en valgbar markør. Mens ekspresjonsvektoren inneholder forsterkere, promoterregion, termineringskodon, transkripsjonsinitieringssekvens, et replikasjonsorigo, restriksjonsseter og en selekterbar markør. Derfor er dette også en forskjell mellom kloningsvektor og ekspresjonsvektor. Dessuten er plasmider, bakteriofager, bakterielle kunstige kromosomer, kosmider, kunstige pattedyrkromosomer, kunstige gjærkromosomer osv. eksempler på kloningsvektorer. I mellomtiden er ekspresjonsvektorer stort sett plasmider.
Summary – Cloning Vector vs Expression Vector
Basert på deres funksjon i molekylærbiologi, er det to typer vektorer som kloningsvektor og ekspresjonsvektor. En kloningsvektor er et lite DNA-molekyl som leverer fremmed DNA inn i vertscellen. Det finnes forskjellige typer kloningsvektorer som plasmider, bakteriofager, bakterielle kunstige kromosomer, kosmider og kunstige pattedyrkromosomer. I motsetning til dette er en ekspresjonsvektor et plasmid som introduserer genet av interesse i vertscellen og letter genuttrykket for å oppnå proteinproduktet. Ekspresjonsvektorer er plasmider. Dermed er dette sammendraget av forskjellen mellom kloningsvektor og ekspresjonsvektor.
