Nøkkelforskjellen mellom pBR322 og pUC19 er at pBR322 er en plasmidvektor som er 4361 basepar i lengde, mens pUC19 er en plasmidvektor som er 2686 basepar lang.
En kloningsvektor er et lite stykke DNA som kan opprettholdes stabilt i en organisme. Det er også et lite stykke DNA som et fremmed DNA-fragment kan settes inn i for kloningsformål. En vektor inneholder viktige egenskaper som muliggjør praktisk innsetting av et fremmed DNA-fragment i vektorer, slik som restriksjonsseter, en selekterbar markør, reportergen og ekspresjonselement. Kloning ble først utført ved bruk av E.coli. Kloningsvektorer for E. coli inkluderer plasmider, bakteriofager, kosmider og bakterielle kunstige kromosomer (BAC). De mest brukte vektorene er genmanipulerte plasmider. pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer.
Hva er pBR322?
pBR322 er en plasmidvektor. Det er en av de første mye brukte kloningsvektorene for E. coli. Denne vektoren ble først opprettet i 1977 i laboratoriet til Herbert Boyer ved University of California, San Francisco. Det er et sirkulært dobbelttrådet DNA som er 4361 basepar langt.
Figur 01: pBR322
Denne plasmidvektoren har spesielle funksjoner. Norm alt har den to antibiotikaresistensgener: genet bla som koder for ampicillinresistens (AmpR) proteinet og genet tetA som koder for tetracyklinresistensen (TetR)) protein. Dessuten inneholder den opprinnelsen til replikasjonen av pMB1. Denne plasmidvektoren har også rop-gen som koder for en restriktor av plasmidkopinummer. Videre har denne vektoren unike restriksjonsseter for mer enn 40 restriksjonsenzymer. Elleve av disse førti restriksjonsstedene ligger innenfor TetR genet. Det er to restriksjonsseter for restriksjonsenzymene HindIII og ClaI innenfor promoteren til TetR -genet. Videre er det seks svært viktige restriksjonssteder innenfor AmpR genet. pBR322 er en kloningsvektor med lavt kopiantall. Den gir omtrent 20 plasmidkopier per bakteriecelle. Molekylvekten til vektoren er 2,83×106 d altons.
Hva er pUC19?
pUC19 er en plasmidvektor som er 2686 basepar lang. Det er en av seriene med plasmidvektorer laget av Joachim Messing og medarbeidere. Det tidlige arbeidet med denne plasmidserien ble utført ved University of California. Det er et sirkulært dobbelttrådet DNA.
Figur 02: pUC19
Denne plasmidvektoren inneholder også viktige funksjoner. Den har et N-termin alt fragment av β-glaktosidase (lacz) genet. Den har også en region med flere kloningssteder (MCS). Denne regionen er delt inn i kodon 6 og 7 av lacz-genet. MCS-regionen gir mange restriksjonsendonukleaser-restriksjonsseter. I tillegg til β-glaktosidasegenet, koder pUC19 også for et ampicillinresistensgen (AmpR). Dessuten er opprinnelsen til replikasjon avledet fra plasmid pMB1. Selv om pUC19 er liten i størrelse, har den et høyt kopiantall (500-700 kopier per bakteriecelle). Molekylvekten til denne plasmidvektoren er 1,75×106 d altons.
Hva er likhetene mellom pBR322 og pUC19?
- pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer.
- De er populære kloningsvektorer for coli.
- Begge plasmidvektorer har samme replikasjonsopprinnelse som plasmid pMB1.
- Disse vektorene har flere restriksjonsnettsteder.
- Begge plasmidvektorer har et ampicillinresistensgen som en selekterbar markør.
Hva er forskjellen mellom pBR322 og pUC19?
pBR322 er en plasmidvektor som er 4361 basepar lang, mens pUC19 er en plasmidvektor som er 2686 basepar lang. Dermed er dette nøkkelforskjellen mellom pBR322 og pUC19. Videre er pBR322 en plasmidvektor med lavt kopiantall, mens pUC19 er en plasmidvektor med høyt kopiantall.
Infografikken nedenfor viser forskjellene mellom pBR322 og pUC19 i tabellform for sammenligning side ved side.
Sammendrag – pBR322 vs pUC19
De mest brukte kloningsvektorene for E.coli er genmanipulerte plasmider.pBR322 og pUC19 er to typer plasmidvektorer. pBR322 er en plasmidvektor som er 4361 basepar lang, mens pUC19 er en plasmidvektor som er 2686 basepar lang. Så dette er hovedforskjellen mellom pBR322 og pUC19.
