Nøkkelforskjellen mellom helleplate og spredeplate er at et kjent volum av prøven spres på overflaten av agarmediet i spredeplaten, mens et kjent volum av prøven i helleplaten blandes med agar og helles deretter i en tallerken. Når man sammenligner nøyaktigheten til disse to teknikkene, har helleplaten høyere nøyaktighet enn strøplaten.
Standard platetellingsmetode er en vekstbasert tilnærming som teller antall levende (voksende/dyrkbare/levedyktige) mikroorganismer i en prøve. Det er en kraftig metode i bruk i mange mikrobiologiske felt for å analysere antall levende mikroorganismer. Feltene som mat og meieri, medisinsk, miljømessig, akvatisk og landbruk, mikrobiell genetikk, molekylær mikrobiologi, utvikling av vekstmedier og bioteknologi (bioreaktorteknologi, fermentering, avfalls-/avløpsvannbehandling etc) benytter denne teknikken. Videre er det to hovedmåter å utføre en standard tallerkentelling: de er, Spreddeplateteknikk og Helleplateteknikk.
Hva er Pour Plate?
Helpeplateteknikk er en mikrobiell metode for å telle opp noen levedyktige celler som er tilstede i en prøve. Spesialiteten til helleplatemetoden er at et kjent volum av prøven først blandes med agar og deretter helles i platen.
Figur 01: Hell tallerken
Andre trinn ligner på spredeplateteknikken som er omt alt i neste avsnitt. Det neste trinnet etter å ha hellet agaren blandet med prøven er å la den stivne og inkubere. Etter inkubering er det viktig å telle antall levedyktige kolonier for å beregne den endelige CFU for 1 g eller 1 ml.
Hva er Spread Plate?
Spredeplate er en teknikk for å telle opp levedyktige celler i en prøve. For denne teknikken er en seriefortynning nødvendig for prøven for å sikre at minst én gir opphav til et tellbart antall kolonier. Prosessen her er å pipettere et bestemt volum av fortynning på overflaten av en agarplate og spre den raskt og jevnt over agaroverflaten med en glassspreder, som har blitt flammet og avkjølt med alkohol. Å utføre replikatene er nødvendig for å oppnå en pålitelig middelverdi. Neste trinn er å tørke disse platene i en kort periode, og deretter vende og plassere dem i en inkubator ved en passende temperatur for vekst og i en bestemt inkubasjonsperiode.
Figur 02: Spredeplate
Etter inkubasjon vil undersøkelse av platene vise veksten. Ved en eller flere fortynninger vil antallet celler som er tilstede i inokulantene (f.eks. 100 eller 200μl) gi opphav til mellom 30 og 300 diskrete kolonier på agaroverflaten. Mindre enn 30 kolonitellinger er statistisk upålitelige. Antall over 300 er vanskelige å telle opp og kan føre til feil.
Hva er likhetene mellom helleplate og smøreplate?
- Spredningsplate og helleplate er to teknikker for å oppnå antall levedyktige celler i en prøve.
- Begge er enkle metoder.
- Sampling feil kan oppstå i begge metodene.
- Begrensninger av vekstforhold påvirker resultatet av begge metodene.
- Tekniske feil kan også forstyrre det endelige resultatet av begge metodene.
- Selv om de er levedyktige, er de to metodene ikke i bruk for å dyrke bakterier som ikke kan dyrkes.
Hva er forskjellen mellom helleplate og smøreplate?
Pour plate er en mikrobiell teknikk for å telle opp et antall levedyktige celler i en prøve. Spread plate-teknikk er en annen teknikk for å telle opp bakteriene som vokser på overflaten av mediet. I helleplateteknikk er prosessen å legge prøven på den størknede mediumoverflaten på helleplaten. Men i spred plate-teknikken er prosessen å blande prøven med den smeltede agaren og deretter helle den i platen.
Med hensyn til nøyaktigheten til disse to teknikkene, har helleplaten høyere nøyaktighet enn strøplaten. Dessuten, i motsetning til i en helleplate, brukes en glassspreder for å spre prøven jevnt på overflaten på en spredeplate. Videre, ved å bruke helleplate, er det mulig å telle opp de aerobe, anaerobe og fakultative anaerobe. Ved å bruke spredeplaten er det imidlertid kun mulig å telle opp aerobe. Videre er størknede agarplater nødvendig for å utføre spredeplater, mens flytende smeltede agarmedier er nødvendige for hellemetoden.
Sammendrag – Hell tallerken vs Spread Plate
Pour plate og Spread plate er to teknikker innen mikrobiologi for å lette opptellingen av mikrobielle celler i en prøve. Begge metodene er vekstbaserte, og mål derfor de levedyktige cellene. Under helleplaten blandes et kjent volum av prøven med den smeltede agaren og helles i platen. Under spredningsplaten spres et kjent volum på overflaten av det størknede agarmediet. Dette er forskjellen mellom skjenketallerken og smøretallerken.
