Nøkkelforskjell – inokulering vs inkubasjon
Mikroorganismer dyrkes i laboratorier og industrier for ulike formål som karakterisering, differensiering, identifikasjon, utvikling av antibiotika, utvikling av vaksiner, produksjon av transgene (GMO) planter og dyr, og utvinning av organiske syrer. De dyrkes i kunstig syntetiserte vekstmedier eller i naturlige substrater. Derfor bør forskjellige typer sterile ferske medier tilberedes, og de ønskede mikroorganismene dyrkes i rene eller blandede kulturer. Medier er supplert med alle næringsstoffer som er nødvendige for veksten av mikroorganismen. Handlingen med å introdusere mikroorganismen i ferskt medium eller substrat er kjent som inokulering. Imidlertid bør de optimale vekstbetingelsene tilveiebringes for å oppnå tilstrekkelig vekst av mikroorganismen. Prosessen med å gi de nødvendige vekstbetingelsene som temperatur, fuktighet og pH og la mikroorganismer vokse på media er kjent som inkubasjon. Den viktigste forskjellen mellom inokulering og inkubasjon er at inokulering er introduksjonen av mikroorganismer til vekstmedier eller substrater, mens inkubering lar mikroorganismer vokse under tilførte vekstforhold.
Hva er inokulering?
Inokulering er prosessen med å introdusere mikroorganismer i et vekstmedium som er egnet for deres vekst. Med andre ord kan inokulering defineres som prosessen som introduserer en patogen eller antigen mikroorganisme i en levende organisme for å stimulere produksjonen av antistoffer. Når inokuleringen er fullført, begynner mikroorganismer å vokse og formere seg i mediet ved å danne synlige kolonier.
Det finnes forskjellige typer inokulasjonsverktøy og -teknikker som brukes i mikrobiologi. Inokuleringsløkke, inokuleringsnål, bomullspinner, pinsett, glasspredere, dispenserpipetter er de vanligste inokuleringsverktøyene i laboratorier. Alle disse materialene skal være fri for forurensninger. Derfor, før inokulering, er det nødvendig å sterilisere dem ved å bruke en egnet steriliseringsteknikk for å unngå forurensning eller vekst av uønskede mikroorganismer i kulturmediet. Strekeplatemetode, spreplassmetode, helleplatemetode, punktinokulering, stikkkultur, skråkultur er flere inokuleringsteknikker som brukes i mikrobielle laboratorier for å dyrke bakterier og sopp.
Figur 01: Inokulering av bakterie ved bruk av strekplateteknikk
Hva er inkubasjon?
Mikroorganismer har forskjellige vekstkrav. De bør forsynes med nødvendige næringsstoffer, vann, mineraler, vekstfaktorer, sporstoffer og andre vekstforhold. Etter inokulering av en mikrobe i et friskt medium, bør vekstforholdene opprettholdes for å støtte veksten av mikroorganismen. Prosessen med å la mikroorganismer vokse i et medium ved å gi nødvendige vekstforhold er kjent som inkubasjon. Inokulerte kulturplater kan plasseres inne i en enhet som kalles inkubator for inkubering. Inkubatorer er utformet på en slik måte at operatøren kan kontrollere temperatur, fuktighet, gasskonsentrasjoner osv. i henhold til mikrobekravet.
Hva er fasene i mikrobiell vekst?
Når optimale forhold er gitt, har mikroorganismer en tendens til å vokse, reprodusere og formere seg ved å utnytte de tilgjengelige næringsstoffene i mediet. Mikrobiell vekst har fire distinkte faser i et kulturmedium. Etter inokuleringen starter de etterslepfasen. Under lagfasen viser ikke mikrober en rask vekst eller formering. De begynner å tilpasse seg det nye miljøet og stabilisere seg der. Når de er justert, starter den andre fasen, som viser en eksponentiell vekst av mikroorganismen. Den andre fasen er kjent som logfase eller eksponentiell fase. Under loggfasen viser mikrober optimal veksthastighet og multiplikasjon. Tredje fase starter etter loggfase når næringsstoffene og andre behov er begrenset i mediet. Under den stasjonære fasen blir vekst- og dødshastigheten like, og vekstkurven er i en rett linje parallelt med x-aksen. Den fjerde fasen er dødsfasen der dødsraten overstiger vekstraten. Etter flere dager opphører mikrobiell vekst, og etterlater seg en død kultur.
Figur 02: Mikrobiell plateinkubator
Hva er forskjellen mellom inokulering og inkubasjon?
Inokulasjon vs inkubasjon |
|
| Inokulering er prosessen med å introdusere mikroorganismer eller suspensjon av mikroorganismer i et kulturmedium. | Inkubasjon er prosessen med å la inokulerte mikroorganismer vokse under nødvendige vekstforhold. |
| Verktøy brukt | |
| Inokulering kan gjøres med inokuleringsnåler, inokuleringsløkker, bomullsbytter, pipetter, etc. | Inkubasjon kan gjøres i kulturrom, inkubator, kulturstativ osv. |
| Time | |
| Inokulering utføres innen kort tid. | Inkubasjonen tar flere timer til dager. |
| Betingelser vedlikeholdt | |
| Inokulering gjøres under aseptiske forhold inne i et laminært luftkabinett. | Inkubasjon gjøres ved å sørge for passende vekstforhold som temperatur, fuktighet, oksygenkonsentrasjon, lys osv. |
Sammendrag – Inokulasjon vs inkubasjon
Inokulering og inkubasjon er to hovedtrinn involvert i dyrking av mikroorganismer i laboratorier. Inokulering er handlingen ved å introdusere mikroorganismer til et passende kulturmedium eller substrat. Inokulerte medier er utstyrt med passende vekstbetingelser for å vokse og formere seg. Denne prosessen er kjent som inkubasjon. Dette er hovedforskjellen mellom inokulering og inkubasjon. Det finnes spesialverktøy og utstyr i mikrobielle laboratorier for inkubasjonsformål. Inkubatoren er en enhet som lar mikroorganismer vokse under kontrollert temperatur, lufting, fuktighet osv. Inokulering og inkubering bør utføres etter riktige aseptiske forhold for å forhindre forurensning og sløsing med tid.
Last ned PDF-versjon av Inoculation vs Incubation
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til offline-formål i henhold til sitatnotater. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom inokulering og inkubasjon.
