Eluent vs Eluate
Kromatografi er en mye brukt metode for å separere komponenter fra en blanding. Denne metoden bruker en stasjonær fase og en mobil fase. Komponenter av en blanding føres gjennom den stasjonære fasen av strømmen av mobil fase. I kromatografi er separasjoner basert på forskjeller i migrasjonshastigheter mellom mobilfasekomponentene. I en pakket kolonne oppløses komponenter ved eluering. Kolonnen består av et sm alt rør, som er pakket med et fast stoff som holder den stasjonære fasen. Selve faststoffet kan være den stasjonære fasen. Noen ganger brukes et inert fast stoff, som holder den stasjonære fasen. Mobil fase kan innføres fra toppen av røret, og den vil da oppta mellomrommene mellom de stasjonære fasene. Til å begynne med lastes løsningsblandingen som inneholder komponentene, som må løses, inn i kolonnen. For lasting kan noe av mobil fase brukes. I henhold til polaritetene vil komponentene i blandingen fordele seg mellom stasjonær fase og mobil fase. Eluering skjer deretter ved å tvinge prøvekomponentene gjennom kolonnen ved kontinuerlig å tilsette fersk mobil fase. Fra tid til annen kan komponentene som kommer ut av kolonnen samles i reagensrør. Som den mobile fasen kan vi bruke løsemiddelblandinger avhengig av komponentene vi skal separere. Ved å bruke en serie løsemidler i henhold til en polaritetsgradient kan vi skille alle komponentene individuelt. Annet enn den ovenfor forklarte væskekromatografimetoden, kan vi også bruke gasskromatografi for å skille gassformige prøver. I dette tilfellet er den mobile fasen en gass, som er kjent som bæregassen.
Eluent
Eluent er delen av den mobile fasen som bærer prøvekomponentene med seg. I væskekromatografi er elueringsmiddel løsningsmidlet som brukes som mobil fase. I gasskromatografi er det bærergassen. Vanligvis er elueringsgassen i gasskromatografi en inert/ikke-reaktiv gass som helium eller nitrogen. Eluenten beveger seg nedover kolonnen som inneholder prøven. Siden eluenten og den stasjonære fasen har motsatte polariteter, samhandler ikke eluenten med den stasjonære fasen. Derfor er dens bevegelse uavhengig. Hvis komponentene i prøven har en lignende polaritet som elueringsmidlet, har de høy affinitet til hverandre. Dette letter bevegelsen av prøven.
Eluate
Eluate er det som kommer ut av sp alten. Vanligvis inneholder denne mobil fase og analyttene fra prøven, som vi ønsket å separere. Ved å endre typen eluent som vi legger til, får vi eluat som inneholder forskjellige komponenter i prøven. Så ved å fjerne den mobile fasen (ved å fordampe), kan vi isolere de individuelle analyttene som var i prøven.
Hva er forskjellen mellom Eluent og Eluate?
• Eluent er delen av den mobile fasen som bærer prøvekomponentene med seg. Eluat er kombinasjonen av den mobile fasen og analyttene. Derfor er eluate det vi er interessert i.
• Vi legger til eluent i kolonnen, og eluate er det som kommer ut av kolonnen.
• Vi kan bestemme og kontrollere hva vi legger til som eluent, men eluatets natur er avhengig av eluenten. Vi kan ikke kontrollere dens bestanddeler 100%.