Key Difference – Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Immunocytochemistry (ICC) og Immunohistochemistry (IHC) er to mye brukte teknikker innen molekylær diagnostikk, som identifiserer og bekrefter forekomsten av både ikke-smittsomme sykdommer og smittsomme sykdommer basert på de molekylære markørene som finnes på cellene. Nøkkelforskjellen immuncytokjemi og immunhistokjemi er molekylet som brukes som analyseprosedyre i disse teknikkene. I ICC brukes primære og sekundære antistoffer konjugert med markører som fluorescens, mens IHC, monoklonale og polyklonale antistoffer brukes til de diagnostiske bestemmelsene.
Hva er immuncytokemi (ICC)?
ICC bruker primære og sekundære antistoffer bundet til markører som fluorescerende markører eller enzymer, og er en kraftig deteksjonsmetode for å oppdage antigener som finnes på målceller som enten kan være infeksiøse cellulære partikler eller kreftsvulstceller. Tre typer kontroller kreves for immuncytokjemi.
- Primært antistoff – kontroll som viser spesifisiteten til det primære antistoffet som binder seg til antigenet
- Sekundært antistoff – kontroll som viser at etiketten er spesifikk for det primære antistoffet
- Etikettkontroller – vis at merkingen er resultatet av etiketten som er lagt til og ikke resultatet av endogen merking.
Figur 01: Immunocytokjemi merker individuelle proteiner i celler (her er tyrosinhydroksylase i aksonene til sympatiske autonome nevroner vist i grønt).
Den primære antistoffkontrollen er spesifikk for hvert nytt antistoff og kan ikke gjentas for hvert eksperiment. Den sekundære antistoffkontrollen er designet basert på det primære antistoffet som brukes i eksperimentet og er inkludert i hvert eksperiment. Merkingskontrollen er inkludert hvis en betingelse for prosedyren endres, prøven endres, eller når uventet merking blir funnet.
De to hovedapplikasjonene til ICC er Radio Immuno – Assay (RIA) og Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA). Det vanligste antistoffet som brukes er immunoglobulin G.
Hva er immunhistokjemi (IHC)?
I immunhistokjemi inneholder kildeprøven monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener i fremmede celler. Denne teknikken er basert på den spesifikke reaksjonen av antigen-antistoffbinding. Antistoffene som brukes til påvisning kan merkes med forskjellige markører; de kan være fluorescensmarkører, radiomerkede markører eller kjemiske markører. Ved å lette in vitro-bindingen mellom antigenet og det målrettede antistoffet, kan tilstedeværelsen eller fraværet av et bestemt protein i en celle bestemmes.
Figur 02: Immunhistokjemisk farging av normal nyre med CD10
For tiden er forskere involvert i å utvikle målantistoffer for spesifikke antigener som er tilstede i celler som enten kan utvikle seg som ondartede tumorceller eller antigener som finnes i smittestoffer som HIV.
Hva er likhetene mellom immunocytokjemi og immunhistokjemi?
- Reaksjonene er svært spesifikke og nøyaktige i ICC og IHC.
- Anvendelsene til ICC og IHC inkluderer diagnostikk av kreft og infeksjonssykdommer.
- Sterile forhold bør opprettholdes under begge forholdene, og de bør utføres in vitro
- Begge teknikkene gir reproduserbare resultater.
- Begge er raske.
- Radiomerking, fluorescensteknikker brukes som deteksjonsmetoder i både ICC og IHC.
- Begge er basert på antigen-antistoff-paring.
Hva er forskjellen mellom immunocytokjemi og immunhistokjemi?
Immunocytochemistry (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC) |
|
| ICC bruker primære og sekundære antistoffbundne markører som fluorescerende markører eller enzymer og er en kraftig deteksjonsmetode for å oppdage antigener som finnes på målceller. | IHC er en metode som bruker monoklonale og polyklonale antistoffer for å bestemme tilstedeværelsen av antigener som er spesielle proteinmarkører plassert på celleoverflatene. |
| Eksempelkilde | |
| Prøver avledet fra vev som har blitt histologisk behandlet til tynne seksjoner, brukes i ICC. | IHC bruker prøver som består av celler dyrket i et monolag eller celler i suspensjon som er avsatt på et objektglass. |
| Eksempelbehandling | |
| I ICC bør cellene være permeable for å lette antistoffpenetrasjon til de intracellulære målene. | I IHC er cellene formalinfiksert, parafininnstøpt før farging. |
Summary – Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Molekylær diagnostikk brukes til å identifisere og bekrefte forekomsten av både ikke-smittsomme sykdommer og smittsomme sykdommer basert på de molekylære markørene som finnes på cellene. Molekylære markører kan være proteiner eller sekvenser av DNA eller RNA; utvikling av teknologier som ICC og IHC har banet vei for forskere å identifisere sykdommen og dens årsak på et tidlig stadium. Både ICC og IHC avhenger av de spesifikke reaksjonene mellom antistoff og antigen selv om prøvekilden. Hovedforskjellen mellom immuncytokjemi og immunhistokjemi er prøvebehandlingen av de to prosedyrene.
Last ned PDF-versjon av Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til offline-formål i henhold til sitat. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom immuncytokjemi og immunhistokjemi.
