Nøkkelforskjell – RPMI vs DMEM
De fleste forskningsstudier involverer dyrking av dyreceller, og derfor krever disse studiene vedlikehold av dyrecellelinjer under spesielle vekstforhold. Dyrecelledyrking utføres mye i farmakologiske studier for å identifisere legemiddelmetabolisme, i sykdomsdiagnostikk og i kreftforskning. Cellekulturmediet er et viktig aspekt ved dyrecellekultur. Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) og Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) er to kulturmedier som brukes i dyrecelledyrking. RPMI er et medium som brukes mye til å dyrke pattedyrceller i suspensjonskultur. DMEM er en modifisert type basalmedium, med økte aminosyre- og vitaminkonsentrasjoner opptil en firedobling. DMEM brukes til å dyrke celler i adherente kulturer. Den viktigste forskjellen mellom de to mediene er typen medienes kultur. RPMI brukes på suspensjonskulturer, mens DMEM brukes til å dyrke adherente celler.
Hva er RPMI?
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium er også referert til som RPMI 1640. Navnet på mediene ble avledet av instituttet der mediene ble oppdaget. Dette mediet brukes ofte i dyrecellekultur, spesielt for vekst av pattedyrceller. De ble opprinnelig utviklet for å dyrke humane lymfocytter.
Følgende ingredienser er inkludert i RPMI.
- Glucose
- pH-indikator (fenolrød)\
- S alter (natriumklorid, natriumbikarbonat, dinatriumfosfat, kaliumklorid, magnesiumsulfat og kalsiumnitrat)
- Aminosyrer
- Vitaminer (i-inositol, kolinklorid, para-aminobenzosyre, folsyre, nikotinamid, pyridoksinhydroklorid, tiaminhydroklorid, kalsiumpantotenat, biotin og riboflavin, cyanokobalamin)
Det spesielle med RPMI er den økte konsentrasjonen av fosfat i mediet. RPMI brukes i en 5% karbondioksidatmosfære. Dette vil gi maksimale og optimale forhold for cellevekst. Mediets pH holdes på 8,0 av bikarbonatbuffersystemet.
Figur 01: Cellekultur på en petriskål
Applikasjoner av RPMI i celledyrking
- Dyrking av humane T- og B-lymfocytter, benmargsceller og hybridom.
- Brukes til å studere humane neoplastiske celler.
Hva er DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) er et modifisert medium som er kommersielt tilberedt. Den opprinnelige teksturen til medium pulveret er gul. I DMEM økes vitaminkonsentrasjonen opptil fire ganger, og øker dermed næringsinnholdet i mediet.
DMEM er også modifisert ved å tilsette flere s alter som jernnitrat, natriumpyruvat og noen ikke-essensielle aminosyrer som serin og glycin. Formuleringen av glukose i media er også endret. Den opprinnelige formuleringen er sammensatt av 1000 mg/L glukose, mens i DMEM økes konsentrasjonen opp til 4500 mg/L. DMEM krever også tilskudd av et serummedium da det ikke er et komplett medium. Oftest suppleres DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS gir de nødvendige proteinene og vekstfaktorene for dyrkingsprosessen.
pH i mediet varierer ved tilsetning av natriumbikarbonat. pH i mediet før tilsetning av natriumbikarbonat er rundt 6,80 – 7,40, mens pH etter tilsetning av natriumbikarbonat ligger i området 7,60 – 8,20. Lagringstemperaturen til mediet er 2 – 8 0C.
Figur 02: DMEM
applikasjoner for DMEM
- For å studere den plakkdannende evnen til polyomaviruset i museembryonale celler.
- I studier av kontakthemming.
- I forskning og analyse av kyllingcellekulturer.
Hva er likhetene mellom RPMI og DMEM?
- Både RPMI og DMEM brukes i dyrecellekultur.
- Både RPMI- og DMEM-medier er flytende formuleringer.
- Både RPMI- og DMEM-medier inneholder de essensielle aminosyrene, vitaminene og uorganiske s alter som kreves for vekst.
- Både RPMI- og DMEM-medier er ufullstendige. Derfor bør serum tilsettes.
- Både RPMI- og DMEM-medier bruker glukose som karbonkilde.
- Både RPMI- og DMEM-medier har en høyere pH.
Hva er forskjellen mellom RPMI og DMEM?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI er et medium som brukes mye for å dyrke pattedyrceller i en suspensjonskultur. | DMEM er en modifisert type basalmedium med økte aminosyre- og vitaminkonsentrasjoner. |
| Tilstedeværelse av ekstra fosfater | |
| Til stede i RPMI. | Fraværende i DMEM. |
| Bruk | |
|
Brukes til å dyrke celler i adherente kulturer. Det er vant til
|
| Types of Culture | |
| RPMI brukes til suspensjonskulturer. | DMEM brukes for kulturer med cellevedheft. |
Sammendrag – RPMI vs DMEM
Både RPMI og DMEM er mye brukt i dyrecelledyrking, spesielt for å dyrke dyrecellelinjer inkludert lymfocytter in vitro. DMEM er et modifisert basalmedium hvor det er økt næringskonsentrasjon. RPMI utviklet av Roswell Park Memorial Institute, og det er også et medium som brukes i dyrecelledyrking spesielt for pattedyrlymfocytter. Begge mediene er kommersielt tilgjengelige. Dette er forskjellen mellom RPMI og DMEM.
