Nøkkelforskjell – TLC vs HPTLC
TLC og HPTLC er to kjemiske teknikker som brukes for å separere ikke-flyktige komponenter i en blanding. Hovedforskjellen mellom TLC og HPTLC er at det absorberende materialet i TLC-platen har store partikler, mens HPTLC-platene har veldig små partikler av adsorberende materiale.
TLC er tynnsjiktskromatografi. HPTLC er høyytelses tynnsjiktskromatografi, som er en avansert teknikk sammenlignet med TLC-metoden.
Hva er TLC?
TLC eller tynnsjiktskromatografi er en grunnleggende kjemisk teknikk som brukes til å separere ikke-flyktige komponenter i en blanding. Dette eksperimentet utføres med glass, plast eller papir. Dette arket er belagt med et tynt lag cellulose eller silikagel (et adsorberende materiale). Dette tynne laget er kjent som den stasjonære fasen av TLC. Arket er kjent som TLC-platen.
Før eksperimentet er en grunnlinje og en overlinje merket med en blyant på TLC-platen. Deretter blir prøven flekket langs denne linjen ved hjelp av et kapillærrør. Etter det plasseres TLC-platen vertik alt i en mobil fase. Den mobile fasen er et løsemiddel (eller en blanding av løsemidler) plassert i en beholder. Når man plasserer TLC-platen i denne mobile fasen, bør man holde grunnlinjen over marginen til løsemidlet. Ellers vil prøven bli oppløst i løsemidlet.
TLC-plate får være i mobilfasen en stund. Deretter, med tiden, stiger den mobile fasen oppover platen på grunn av kapillærvirkning. Hvis prøven er løselig i den mobile fasen, vil den stige oppover sammen med den mobile fasen.
«like oppløser like»-prinsippet ligger bak denne TLC-metoden. Dette betyr at polare forbindelser løses opp i polare løsningsmidler, mens ikke-polare forbindelser løses opp i ikke-polare løsningsmidler. Den stasjonære fasen er vanligvis silikagel eller cellulose, som er en polar forbindelse. Den mobile fasen som brukes er et ikke-polart løsningsmiddel som heksan. Derfor, hvis prøven inneholder noen ikke-polare komponenter, vil disse komponentene migrere oppover sammen med den mobile fasen. Polarkomponenter vil feste seg til platen. Blant de bevegelige komponentene vil moderat upolare forbindelser migrere sakte, mens svært upolare forbindelser vil migrere raskt. Når løsemiddelfronten har nådd topplinjen på TLC-platen, tas platen ut og lar tørke.
Figur 01: TLC-teknikk
Hvis komponentene i prøven var fargede forbindelser, bør det være fargerike flekker på platen på forskjellige steder. Men hvis komponentene var fargeløse, bør noen andre teknikker brukes; for eksempel spraying av ninhydrin for å oppdage ammoniakk eller aminer (primære aminer og sekundære aminer).
Hva er HPTLC?
HPTLC eller høyytelses tynnsjiktskromatografi er den avanserte formen for tynnsjiktskromatografi (TLC). Oppløsningen og nøyaktigheten til HPTLC er svært høy. De fleste trinnene i denne teknikken kan automatiseres.
Platene som brukes i HPTLC inneholder silikagelpartikler med svært liten størrelse og pakkingstettheten til gelen på platen er høy. Overflaten på platen er glatt og gir effektiv separasjon. Analysen er raskere enn TLC-teknikken. Følsomheten til denne metoden er også høy. I HPTLC kan flere forskjellige prøver separeres i samme plate uten noe prøveprepareringstrinn.
Hva er forskjellen mellom TLC og HPTLC?
TLC vs HPPTLC |
|
| TLC er tynnsjiktskromatografi. | HPTLC er tynnsjiktskromatografi med høy ytelse. |
| Teknikk | |
| Det er en grunnleggende kjemisk teknikk som brukes til å separere ikke-flyktige komponenter i en blanding. | Det er den avanserte formen for tynnsjiktskromatografi (TLC). |
| Plate | |
| TLC-plate kan være laget av papir, plast eller glass som påføres et adsorberende materiale med store partikler. | HPTLC-plater har svært små partikler av adsorberende materiale. |
| Oppløsning | |
| TLC-metoden gir dårlig oppløsning når prøven har komponenter med lignende egenskaper. | HPTLC-metoden gir høy oppløsning. |
| Time | |
| TLC-teknikk er en tidkrevende teknikk. | HPTLC gir resultater med høyere hastighet enn TLC-metoden. |
Sammendrag – TLC vs HPTLC
HPTLC er den avanserte formen for TLC. Hovedforskjellen mellom TLC og HPTLC er at TLC-platen kan være laget av papir, plast eller glass som påføres et adsorberende materiale med store partikler, mens HPTLC-plater har svært små partikler av adsorberende materiale.
