Nøkkelforskjell – Flowcytometri vs FACS
I sammenheng med celleteori er celler den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellesortering er en metodikk som brukes til å skille forskjellige celler i henhold til de fysiologiske og morfologiske egenskapene. De kan ha intracellulære eller ekstracellulære egenskaper. Interaksjon mellom DNA, RNA og proteiner betraktes som intracellulære interaktive egenskaper, mens form, størrelse og forskjellige overflateproteiner betraktes som ekstracellulære egenskaper. I moderne vitenskap har cellesorteringsmetoder ført til å hjelpe ulike undersøkelser i biologiske studier og også i etableringen av nye prinsipper gjennom forskning på medisin. Cellesortering utføres på ulike metoder som inkluderer både primitive med mindre utstyr og avanserte teknologiske metoder med bruk av sofistikert maskineri. Flowcytometri, fluorescerende aktivert cellesortering (FACS), magnetisk celleseleksjon og enkeltcellesortering er de viktigste metodene som brukes. Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. FACS er en spesialisert type flowcytometri. Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lyssprednings- og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er hovedforskjellen mellom flowcytometri og FACS.
Hva er flytcytometri?
Flowcytometri er en metode som brukes til å undersøke og bestemme uttrykket av intracellulære molekyler og celleoverflaten og for å definere og karakterisere distinkte celletyper. Det brukes også til å bestemme cellevolum og cellestørrelse og for å evaluere renheten til subpopulasjoner som er isolert. Dette tillater flerparameterevaluering av enkeltceller omtrent samtidig. Flowcytometri brukes til å måle intensiteten av fluorescens som produseres på grunn av fluorescensmerkede antistoffer som hjelper til med å identifisere proteiner eller ligander som binder seg til assosierte celler.
Figur 01: Flowcytometri
Generelt omfatter flowcytometri hovedsakelig tre undersystemer. De er fluidikken, elektronikken og optikken. I flowcytometri er fem hovedkomponenter tilgjengelige som brukes i cellesortering. De er en strømningscelle (en strøm av væske som brukes til å transportere dem og justere cellene for optisk registreringsprosess), et målesystem (kan være av forskjellige systemer inkludert kvikksølv- og xenonlamper, høyeffekts vannkjølte eller laveffekt luftkjølte lasere eller diodelasere), en ADC; Analog til digital omformer system, forsterkningssystem og en datamaskin for analyse. Anskaffelsen er prosessen der dataene samles inn fra prøvene ved hjelp av flowcytometer. Denne prosessen formidles av en datamaskin som er koblet til flowcytometeret. Programvaren som finnes i datamaskinen analyserer informasjonen som mates til datamaskinen fra flowcytometeret. Programvaren har også muligheten til å justere parametere for eksperimentet som kontrollerer flowcytometeret.
Hva er FACS?
I sammenheng med Flowcytometri er fluorescensaktivert cellesortering (FACS) en metode som brukes til å differensiere og sortere en prøve av en blanding av biologiske celler. Cellene er separert fra to eller flere beholdere. Sorteringsmetoden er basert på de fysiske egenskapene til cellen som inkluderer lysspredning og fluorescensegenskaper til cellen. Dette er en viktig vitenskapelig teknikk, som kan brukes til å oppnå pålitelige kvantitative og kvalitative resultater av fluorescenssignaler som sendes ut fra hver celle. Under FACS, i utgangspunktet, den forhåndsinnhentede blandingen av celler; en suspensjon ledes til midten av en smal strøm av væske som strømmer raskt. Væskestrømmen er designet for å skille cellene i suspensjonen basert på diameteren til hver celle. En vibrasjonsmekanisme påføres suspensjonsstrømmen som resulterer i dannelsen av individuelle dråper.
Figur 02: FACS
Systemet er kalibrert for å lage en enkelt dråpe med én celle. Rett før dannelsen av dråper beveger strømningssuspensjonen seg langs et fluorescensmåleapparat som detekterer fluorescenskarakteristikken til hver celle. Ved dannelsen av dråper plasseres en elektrisk ladering som en ladning induseres til ringen før måling av intensiteten av fluorescens. Når dråpene er dannet fra suspensjonsstrømmen, fanges en ladning inne i dråpene som deretter går inn i et elektrostatisk avbøyningssystem. Ifølge siktelsen avleder systemet dråpene til forskjellige beholdere. Metoden for påføring av ladningen varierer i henhold til forskjellige systemer som brukes i FACS. Utstyret som brukes i FACS er kjent som en fluorescensaktivert cellesortering.
Hva er likheten mellom flowcytometri og FACS?
Flowcytometri og FACS er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper
Hva er forskjellen mellom flowcytometri og FACS?
Flowcytometri vs FACS |
|
| Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. | FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lyssprednings- og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. |
Sammendrag – Flowcytometri vs FACS
Cellen er den grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheten til alle levende organismer. Cellesortering er prosessen der celler isoleres og differensieres i forskjellige kategorier basert på deres intracellulære og ekstracellulære egenskaper. Flowcytometri og FACS er to viktige metoder i cellesortering. Begge prosessene er utviklet for å differensiere celler i henhold til deres optiske egenskaper. Flowcytometri er en metodikk som brukes under analyse av en heterogen populasjon av celler i henhold til forskjellige celleoverflatemolekyler, størrelse og volum som tillater undersøkelse av enkeltceller. FACS er en prosess der en prøveblanding av celler sorteres i henhold til deres lyssprednings- og fluorescensegenskaper i to eller flere beholdere. Dette er forskjellen mellom flowcytometri og FACS.
Last ned PDF-versjonen av Flow Cytometry vs FACS
Du kan laste ned PDF-versjonen av denne artikkelen og bruke den til offline-formål i henhold til sitat. Last ned PDF-versjon her Forskjellen mellom flowcytometri og FACS
