Nøkkelforskjellen mellom UV-vis og fluorescensspektroskopi er at UV-synlig spektroskopi måler absorpsjonen av lys i det UV-synlige området, mens fluorescensspektroskopi måler lyset som sendes ut av en prøve i fluorescensområdet etter å ha absorbert lys kl. høy energi enn det utsendte energinivået.
Spektroskopi er en teknikk for måling av absorpsjon og emisjon av lys og annen stråling fra materie.
Hva er UV Vis-spektroskopi?
UV synlig spektroskopi er en analytisk teknikk som bruker absorpsjonen eller reflektansen til en del av UV-området og komplette tilstøtende synlige områder av det elektromagnetiske spekteret. Denne teknikken kommer i to typer; de er absorpsjonsspektroskopi og reflektansspektroskopi. Den bruker lys i de synlige og tilstøtende områdene.
Generelt kan absorpsjonen eller reflektansen til det synlige lysområdet direkte påvirke den oppfattede fargen til kjemikaliene som er involvert i prosessen. På dette området av spekteret kan vi observere at atomer og molekyler kan gjennomgå elektroniske overganger. Her er absorpsjonsspektroskopi komplementær til fluorescensspektroskopi, hvor fluorescens omhandler overganger av elektroner fra eksitert tilstand til grunntilstand. I tillegg måler absorpsjon overgangene fra grunntilstanden til den eksiterte tilstanden.
Figur 01: UV synlig spektroskopi
Denne spektroskopiske teknikken er nyttig for å analysere forskjellige prøver kvantitativt, for eksempel overgangsmetallioner, sterkt konjugerte organiske forbindelser og makromolekyler i biologiske systemer. Generelt utføres spektroskopisk analyse ved hjelp av løsninger, men vi kan også bruke faste stoffer og gasser.
Hva er fluorescensspektroskopi?
Fluorescensspektroskopi er en type elektromagnetisk spektroskopi som er nyttig for å analysere fluorescens fra en prøve. Denne teknikken innebærer bruk av en lysstråle (som UV) for å eksitere elektroner i molekyler av noen forbindelser, og det kan få dem til å sende ut lys. Vanligvis er denne emisjonen synlig lys, men ikke nødvendigvis den samme.
Figur 02: Fluorescensspektroskopi
Vanligvis har molekyler forskjellige tilstander som er kjent som energinivåer. Denne teknikken er først og fremst opptatt av elektroniske og vibrasjonstilstander. Ofte har analyttprøven molekyler i en jordet elektronisk tilstand og en eksitert tilstand med høyere energi. Disse to elektroniske tilstandene har forskjellige vibrasjonstilstander mellom seg. Under prosessen med fluorescens, eksiteres de kjemiske artene ved å absorbere fotoner og beveger seg fra en grunntilstand til et høyere energinivå. Deretter fører kollisjonene mellom andre molekyler til at de eksiterte molekylene mister vibrasjonsenergi til de kommer til en lav vibrasjonstilstand fra denne eksiterte tilstanden. Dette sender ut fotoner med forskjellige energier og forskjellige frekvenser. Dette kalles fluorescens. Vi kan analysere disse forskjellige frekvensene som sendes ut på denne måten for å bestemme de forskjellige vibrasjonsnivåene.
Hva er forskjellen mellom UV-vis og fluorescensspektroskopi?
Spektroskopiske teknikker er nyttige for å studere egenskapene til forskjellige kjemiske stoffer. Hovedforskjellen mellom UV-vis og fluorescensspektroskopi er at UV-synlig spektroskopi måler absorpsjonen av lys i det UV-synlige området, mens fluorescensspektroskopi måler lyset som sendes ut av en prøve i fluorescensområdet etter å ha absorbert lys med høy energi enn det som sendes ut. energinivå. Dessuten er fluorescensspektroskopi mer følsom enn UV-synlig spektroskopi.
Infografien nedenfor presenterer forskjellene mellom UV-vis og fluorescensspektroskopi i tabellform for side-ved-side-sammenligning.
Sammendrag – UV Vis vs fluorescensspektroskopi
Spektroskopi er en viktig analyseteknikk. Det finnes forskjellige typer spektroskopi, som IR-spektroskopi, UV-synlig spektroskopi, fluorescensspektroskopi, etc. Hovedforskjellen mellom UV-vis og fluorescensspektroskopi er at UV-synlig spektroskopi måler absorpsjonen av lys i det UV-synlige området, mens fluorescens Spektroskopi måler lyset som sendes ut av en prøve i fluorescensområdet etter å ha absorbert lys med høy energi enn det utsendte energinivået.
