Nøkkelforskjellen mellom insersjons- og erstatningsvektorer er at innsettingsvektoren har evnen til å sette inn moderate lengder av fremmed DNA mens erstatningsvektoren har evnen til å romme større lengder av fremmed DNA.
Fagvektorer er bakteriofagene som brukes til kloning. Det finnes to typer fagvektorer; de er insersjonsvektor og erstatningsvektor. Dessuten består alle fagvektorer av ikke-essensielle gener. Disse genene må imidlertid fjernes fra fager for å muliggjøre nye fremmede DNA-innsettinger.
Hva er en innsettingsvektor?
For det første er innsettingsvektor den enkleste formen for lambda-kloningsvektorer. Faktisk er det en type fagvektor som har et unikt restriksjonssted introdusert i vektorgenomet i posisjonen til valgfritt DNA. Videre forblir fag-DNA uten fjerning. Denne ikke-fjerningen av fag-DNA begrenser størrelsen på innskuddene (fremmed DNA) som skal klones i vektoren. Dessuten er disse vektorene nyttige i cDNA-kloning og ekspresjon. GT10, GT11 og Zap er eksempler på denne vektoren.
Figur 01: Lambda Phage
Innsettingsvektor består av et enkelt gjenkjenningssted. Den primære funksjonen til denne vektoren er å utvikle cDNA-biblioteker avledet fra eukaryote mRNA-sekvenser. Dessuten kan den bare romme lengder av fremmed DNA som varierer mellom 05-11 kb. Den har også et unikt sp altningssted for innsetting av fremmed DNA.
Hva er erstatningsvektorer?
Erstatningsvektor eller substitusjonsvektor er en type fagvektor utviklet fra fjerning av et midtre «fyllfragment»-område av fag-DNA. Det ønskede fremmede DNA-innskuddet erstatter fag-DNA.
Figur 02: Erstatningsvektor
Erstatningsvektorer er viktige for å lage genomiske biblioteker som EMBL4 og Charon40. Disse vektorene kan romme en større lengde av fremmed DNA som varierer mellom 08-24kb lengder. Fyllerregionen består også av et gen som gjør fagvektoren ikke-levedyktig inne i en bakterievert.
Hva er likhetene mellom innsettings- og erstatningsvektorer?
- Innsettings- og erstatningsvektorer er fagvektorer.
- Begge vektorene har plass til fremmed DNA-innlegg.
- De er begge behjelpelige med å lage DNA-biblioteker.
Hva er forskjellen mellom innsettings- og erstatningsvektorer?
Innsetting vs Replacement Vectors |
|
Innsettingsvektor er en type fagvektor som har et restriksjonssted introdusert i faggenomet på stedet for valgfritt DNA. | Erstatningsvektor er en type fagvektor utviklet fra fjerning av et midtre «fyllfragment»-område av fag-DNA |
Størrelse på innleggsfragmenter | |
05-11 kb lengde | 08–24 kb lengde |
Filler Fragment | |
No filler fragment | Fillerfragment blir erstattet av et fremmedinnlegg |
Funksjon | |
Viktig å lage cDNA-biblioteker | Viktig for å lage genombiblioteker |
Eksempler | |
GT10, GT11 og Zap er eksempler | EMBL4 og Charon40 er eksempler |
Cleavage Site | |
Et unikt sp altningssted er til stede | Sp altningssted inneholder gener som ikke er essensielle for den lytiske syklusen |
Summary – Insertion vs Replacement Vectors
Både innsettings- og erstatningsvektorer er to typer fagvektorer. Begge vektorene har restriksjonsseter som letter akkommodasjonen av nye fremmede DNA-innskudd. Innsettingsvektorer er viktige for å lage cDNA-biblioteker mens erstatningsvektorer er viktige for å lage genomiske biblioteker. Videre rommer innsettingsvektorer DNA-innsettinger med moderat lengde. Men erstatningsvektorer kan romme høyere lengder av fremmede DNA-innlegg. Tot alt sett er dette nøkkelforskjellen mellom innsettings- og erstatningsvektorer.