Nøkkelforskjellen mellom CLIA og ECLIA er at CLIA bruker en kjemisk metode for å generere kjemiluminescens mens ECLIA bruker en elektrokjemisk metode for å generere kjemiluminescenssignaler i immunanalyseteknikken.
Immunoassays er mye brukt i identifisering og kvantifisering av proteiner assosiert med sykdommer eller infeksjoner. Derfor stoler de først og fremst på konseptet antistoff-antigenbinding. Det finnes mange typer immunanalyser, og kjemiluminescerende immunanalyser er en slik fremvoksende utviklingsteknikk. Både CLIA og ECLIA bruker kjemiluminescerende indikatorer.
Hva er CLIA?
Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) er en type immunoassay som bruker et selvlysende molekyl for deteksjon. Luminescensen som sendes ut av molekylet detekteres på spektrofotometeret, vanligvis ved en bølgelengde mellom 300 – 800 nm. Kjemiluminescensen forårsaker eksitasjon av atomene, og teknikken identifiserer eksergoniske kjemiske reaksjoner som den mest egnede energikilden for å produsere eksitasjon.
CLIA-teknikken foregår i to hovedmetoder som direkte CLIA-teknikk og indirekte CLIA-teknikk. Den direkte CLIA-teknikken bruker direkte luminofor-markører som er bundet til målet, mens den indirekte CLIA-metoden bruker enzymatiske markører. De direkte luminoformarkørene inkluderer acidum- og rutheniumestere, mens de indirekte markørene inkluderer alkalisk fosfatase med adamantyl 1, 2-dioksetan arylfosfat (AMPPD) substrat og pepperrotperoksidase med luminol eller dets derivater som substrat.
Figur 01: Kjemiluminescens
De viktigste fordelene med CLIA er det brede dynamiske spekteret av funksjonalitet, høy intensitet i signallevering, fravær av bakgrunnsinterferens, høy spesifisitet, hurtighet, stabilitet og kompatibilitet med forskjellige analyseprotokoller. Derimot er deres høye kostnader og begrensninger med hensyn til antigendeteksjon og testpaneler ulempene med CLIA.
Hva er ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) er en ny teknikk for immunoassayutvikling som bruker konseptet elektrokjemiluminescens. I begrepet elektroluminescens genererer mellomproduktene elektrokjemisk. Disse elektronisk genererte mellomproduktene når deretter en eksitert tilstand og resulterer i emisjon av lys. Bølgelengden som lyset sendes ut i tilsvarer energigapet. Kjemiluminescens produseres således på grunn av at en eller flere reaktanter produseres elektrokjemisk på elektroden.
ECLIA er en nyttig analytisk applikasjon med høy sensitivitet og spesifisitet. Det brukes hovedsakelig til å identifisere proteiner relatert til forskjellige patologiske og medisinske tilstander. Dens viktigste fordeler inkluderer bredere dynamisk område, allsidighet, romlig og tidsmessig kontroll ved å bruke elektrodepotensialer, høy følsomhet opp til picomolare områder. Imidlertid er det faktum at det krever eksperthåndtering og de høye kostnadene forbundet med dets ulemper.
Hva er likhetene mellom CLIA og ECLIA?
- Begge teknikkene er avhengige av konseptet antigen-antistoffbinding.
- Dessuten brukes begge hovedsakelig til sykdomsdiagnostikk basert på proteinkvantifisering.
- Begge er sensitive og spesifikke settmetoder.
- De bruker konseptet kjemiluminescens for deteksjon.
- De kan automatiseres.
- Begge krever et spektrofotometer for deteksjon.
- Begge har et bredt dynamisk område.
- Det er kostbare teknikker.
Hva er forskjellen mellom CLIA og ECLIA?
CLIA er en teknikk for immunoassay som bruker teorien om kjemiluminescens, mens ECLIA er en teknikk for immunoassay som bruker teorien om elektrokjemi kombinert med kjemiluminescens. Så dette er nøkkelforskjellen mellom CLIA og ECLIA. Derfor bruker CLIA kjemiske reaksjoner som fører til utvikling av kjemiluminescerende signaler, mens ECLIA bruker elektrokjemiske reaksjoner som fører til utvikling av kjemiluminescerende signaler.
Infografikken nedenfor over forskjellen mellom CLIA og ECLIA viser flere sammenligninger mellom begge teknikkene.
Sammendrag – CLIA vs ECLIA
CLIA og ECLIA er begge teknikker som spiller en viktig rolle i sykdomsdiagnostikk. De er avanserte metoder for immundiagnostikk basert på konseptet antistoff-antigenbinding. Den viktigste forskjellen mellom CLIA og ECLIA er metoden for å generere kjemiluminescens. Mens CLIA bruker kjemiske reaksjoner for å generere kjemiluminescens etter antistoff-antigenbinding, bruker ECLIA elektrokjemiske reaksjoner for å generere kjemiluminescens. Begge teknikkene er imidlertid raske og spesifikke.
